论文摘要
背景和目的不动杆菌属(Acinetobacter spp.)归于奈瑟菌科,广泛分布于自然界和医院环境,鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)是最常见的不动杆菌,是医院感染的一个重要的致病菌,在免疫力低下的患者中,可以引起严重的、甚至致死性的感染,如呼吸机相关肺炎(Ventilator-associated pneumonia,VAP)、败血症、泌尿系统感染、脑膜炎等。近年来,由耐碳青霉烯多重耐药鲍曼不动杆菌引起的严重院内感染呈现逐渐上升的趋势,使临床医生面临巨大挑战,本研究通过流行病学调查碳青霉烯类不敏感鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物的耐药现状,通过分子生物学方法了解其院内传播程度以及其耐药机制,希望能为临床医生合理使用抗菌药物,克服或减少细菌耐药性的出现或传播提供依据。实验方法1、查阅2001-2007年河南省人民医院感染碳青霉烯类不敏感鲍曼不动杆菌(Carbapenemnon-Susceptible Acinetobacter baumannii,CNSAB)患者的病历,总结其标准纸片扩散法药敏结果,回顾调查2001-2007年该院临床分离的非重复的95株CNSAB的耐药和临床分布情况。2、对2007年5月到12月收集的临床非重复26株CNSAB采用E-test和三维试验筛选存在碳青霉烯酶的鲍曼不动杆菌。3、采用随机引物扩增DNA多态性指纹图谱技术(random amplified polymorphic DNA,RAPD)分析2007年5月到12月收集的26株CNSAB流行病学特点。4、采用PCR检测26株CNSAB携带blaIMP-、blaVIM-、blaOXA-23、blaOXA-24和blaOXA-58的情况。采用基因测序对纯化、克隆后的PER扩增产物进行检测。实验结果1、95株CNSAB对头孢菌素类敏感率低,头孢噻肟敏感率为0,其它头孢类抗生素仅为11.5%-25%、喹喏酮类21.9%-29%、阿米卡星15.6%、米诺环素为22.2%;头孢哌酮/舒巴坦敏感性最高为59.4%。2、95株CNSAB常见的标本依次是:痰、脓液、血液,分别占55.8%(53/95)、29.5%(28/95)、5.3%(5/95);常见科室及分布情况为呼吸科、ICU病房、神经外科,分别占27.3%(26/95)、17.9%(17/95)、16.8%(16/95)。3、2007年5-12月收集到的26株CNSAB经RAPD分析,检出A克隆占38.5%(10/26)、B克隆占15.4%(4/26)、C克隆占15.4%(4/26)、D克隆占11.5%(3/26)以及分别只检出1株的E、F、G、H、I克隆(各占3.8%)。4、2007年5-12月收集到的26株CNSAB均产生碳青霉烯酶,经PCR扩增、基因测序共检出携带blaOXA-23的鲍曼不动杆菌占38.5%(10/26),携带blaOXA-58的鲍曼不动杆菌占3.8%(1/26)未检出blaIMP-、blaVIM-和blaOXA-24。结论鲍曼不动杆菌通过产生多种β-内酰胺酶(特别是OXA型碳青霉烯酶)造成多重耐药,在本次研究中发现,CNSAB对酶抑制剂复合剂头孢哌酮/舒巴坦敏感性最高,可以做为临床经验用药的首选。抗生素不合理地使用是造成细菌耐药性增加,继而引发住院感染的主要因素。本研究说明,河南省人民医院有CNSAB的播散流行,其克隆株的传播是造成院内一些科室碳青霉烯类耐药的重要原因,多克隆株的同时流行也提示了各个科室不合理使用抗生素的表现多样性。河南省人民医院CNSAB产生的碳青霉烯酶最常见的有OXA-23型酶,本研究首次在河南省检出了携带blaOXA-58的鲍曼不动杆菌。
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