蜣螂抗前列腺增生症药效物质基础研究

论文摘要

蜣螂药理作用广泛,药效独特。文献研究与现代药理研究均表明蜣螂具有治疗良性前列腺增生的作用,其应用也已从民间走向制剂开发,已经上市的克癃胶囊,即是用于治疗前列腺增生症。本文针对蜣螂的药效作用,采用动物体内、体外药效学实验,筛选抗前列腺增生活性部位,制得了多肽有效部位、并对其进行.药效验证、成分的系统分析和含量测定等研究。主要研究内容如下：首先对蜣螂进行了化学成分系统分析与鉴别,明确了蜣螂体内的化学组分主要包括油脂、蛋白多肽与氨基酸、甲壳素三大类成分。然后采用系统溶剂法与柱层析法,结合急性毒性试验,通过药效筛选（丙酸睾丸酮致小鼠前列腺增生模型与犬膀胱三角肌张力测定）实验,确定蜣螂乙醇提取部位经石油醚萃取后剩余组分有效。对萃取剩余部位进行活性追踪分离,通过大孔树脂、葡聚糖凝胶柱层析、半透膜透析处理等方法,制得了蜣螂多肽纯化部位和游离氨基酸部位。并对多肽纯化部位进行体外药效学验证,确定该部位为蜣螂有效部位,其多肽含量达到83.6%。由于氨基酸在抗前列腺增生方面已有上市制剂,说明其抗前列腺增生是有效的,因此本文明确了蜣螂治疗良性前列腺增生（BPH）的物质基础主要为多肽与氨基酸。其次,对有效部位采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）测定了多肽的分子量在6kDa～14kDa之间,氨基酸自动分析仪测定氨基酸的种类与数量,同时,对该活性部位进行药效验证,采用犬膀胱三角肌张力实验,初步阐明了蜣螂治疗BPH的作用机理为抑制α受体而起效。在急性毒性试验研究中,确定了蜣螂急性毒性部位为水提取部位,测定了其LD50为19.01g生药/kg小鼠。通过氨基酸分析测定了其氨基酸种类和含量,其中结合氨基酸含量为19.53%,即多肽蛋白含量约为19.53%。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 1 蜣螂概述
• 1.1 药用历史沿革
• 1.2 资源分布与生药材鉴定
• 1.3 化学成分研究
• 1.4 药理作用研究
• 1.5 蜣螂复方的临床应用
• 1.6 其他开发应用
• 2 良性前列腺增生症的研究现状
• 2.1 发病机理研究
• 2.2 良性前列腺增生治疗现状
• 3 立题依据
• 4 研究目的与意义
• 5 研究内容与思路
• 第一章 蜣螂化学成分鉴别
• 1 仪器与试药
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二章 蜣螂化学组分性质研究
• 1 油脂的测定
• 1.1 含量测定
• 1.2 性质
• 2 糖含量测定
• 3 总（粗）蛋白含量测定
• 4 小结
• 5 讨论
• 第三章 蜣螂抗前列腺增生活性部位筛选研究
• 第一节 蜣螂急性毒性试验研究
• 1. 蜣螂乙醇提取部位
• 2. 蜣螂水提取部位
• 3. 小结与讨论
• 第二节 蜣螂抗前列腺增生活性部位的筛选
• 1 实验材料
• 2 试验方法
• 3 统计学方法
• 4 试验结果
• 5 小结与讨论
• 第四章 蜣螂有效部位物质基础的研究
• 第一节 有效部位初步分离和药效跟踪研究
• 1 有效提取部位初步分离过程
• 2. 各部位抗前列腺增生药效跟踪
• 3. 小结
• 第二节 70%乙醇洗脱部位分离纯化研究
• 1 实验材料
• 2 氨基酸分析
• 3 有效部位纯化工艺研究
• 4 总多肽纯化部位④氨基酸分析
• 5 总多肽纯化部位④蛋白多肽分子量范围测定
• 6 总多肽纯化部位④进一步分离纯化研究
• 7 小结
• 第三节 蜣螂总多肽纯化部位④体外药效验证试验
• 1 材料
• 2 方法
• 3 统计学方法
• 4 试验结果
• 第四节 沉淀部位和水洗脱部位研究
• 1 材料与仪器
• 2 氨基酸分析
• 3 水洗脱部位除盐研究
• 4 小结
• 第五节 本章小节与讨论
• 第五章 蜣螂水提部位毒性成分初步分析
• 1. 蜣螂水提部位化学成分的分析
• 1.1 凯氏定氮法测定蜣螂水提液中含氮量
• 1.2 氨基酸分析结果
• 2. 水提部位初步分离研究
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 水搅拌提取样品液制备
• 2.4 葡聚糖凝胶G-50柱层析
• 2.5 实验结果及分析
• 3. 小结
• 第六章 结论与展望
• 1. 结论
• 2. 展望
• 3. 先进性和创新性
• 参考文献
• 致谢
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果