论文摘要
目的:睾丸间质细胞瘤是一种发病率较低的肿瘤,约占睾丸肿瘤1-3%。目前恶性睾丸间质细胞瘤尚无有效治疗措施。淫羊藿苷具有较强的诱导肿瘤细胞凋亡的作用,但其是否加剧间质细胞凋亡尚未见报道。因此,本课题拟研究淫羊藿苷对间质细胞株MLTC-1的效应及其机制。方法:小鼠睾丸间质细胞MLTC-1培养于含10%胎牛血清的RPMI1640培养基,置于5% CO2、37℃恒温培养箱中。在培养基中加入不同浓度的淫羊藿苷,用MTT法确定最佳作用浓度及作用时间。随后细胞分为:正常对照组和淫羊藿苷组(50μg/ml淫羊藿苷),24h和48h时分别收集细胞,流式细胞术分析细胞凋亡与倍体情况;利用分光光度法测细胞上清液中caspase-3,8,9水平;Wersternblotting法分析相关蛋白表达。结果:MTT结果显示25, 50,和100μg/ml淫羊藿苷呈浓度和时间依赖增加(24h: 17.1±1.5 % vs 7.6±0.6 % ;48h:24.7±1.6 % vs 8.2±0.56% )。细胞周期结果表明S期细胞比率减少(P<0.05)。Westernblotting结果显示,Bcl-2/Bax比例下降,cytochrome C表达量增加。淫羊藿苷明显激活caspase-3和-9,使Caspase-3和-9水平增高。此外,淫羊藿苷下调piwil4基因表达,进而促进细胞凋亡。结论:淫羊藿苷可通过线粒体途径和piwil4基因途径促进MLTC-1细胞凋亡。