葡萄植原体黄化病及其检疫技术

论文摘要

野生和栽培葡萄上的植原体病害由于引起叶片黄化而被称为葡萄黄化病。本研究称其为葡萄植原体黄化病（GPY）,以便与生理性黄化症和由个别病毒引起的黄化症相区别。本研究对与GPY相关的检疫、检测和鉴定技术进行了系统研究,主要的研究结果如下:①休眠期葡萄植株中植原体的浓度很低,而且分布不均匀。植原体主要存在于根系和尚未完全木栓化的枝条中。②不同植原体检测引物的灵敏度不同,可能相差上千倍。③Eppendorf管人工培养液饲养法该方法是筛选植原体介体昆虫的高效方法。④首次发现自然感染了葡萄上的一种曾被误称为“Vergilungskrankheit”植原体（AY组）的草地脊冠叶蝉Aprodes makarovi Zachvatkin。⑤对嵌套引物P1/P7（U5/P7）-U5/U3的巢式PCR检测植原体时扩增出的0.36 kb的额外片段进行了研究。证明了该额外片段源于植原体16SrRNA基因上存在的一个与U5引物部分互补的位点。⑥尝试结果表明:经过恰当设计,AFLP技术也可以用于植原体的分类和分型。⑦研究认为把“由S. titanus传播”作为区分ALY植原体和FD植原体的条件之一是不合适的。ALY植原体也是FD植原体,即属于FD-C类型的FD植原体。⑧对胶东葡萄产区GPY的调查结果表明:该地区尚未发生GPY;尚不存在已知GPY的传播介体。但有已知GPY的野生寄主植物分布。⑨对GPY进行的有害生物风险分析结果表明:应当将FD植原体、ALY植原体、澳大利植原体候选种以及它们的传播介体列为中国检疫性有害生物。⑩对葡萄金黄化病和S. titanus在中国的潜在分布区分析表明:渤海湾葡萄产区的胶东半岛和辽东半岛、甘肃、云南高原葡萄产区是二者的适生区域。11制定了SN/T×××—2006《葡萄金黄化病植原体检疫鉴定方法》的检验检疫行业标准。同时为标准配套设计了FD植原体检测鉴定试剂盒。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号及缩略词说明
• 1 引言
• 1.1 从支原体到植原体
• 1.2 葡萄植原体黄化病
• 1.3 有害生物风险评估、风险管理和适生区分析
• 1.4 植物检疫的标准化
• 1.5 本研究的立题依据和主要研究内容
• 2 研究报告
• 2.1 第一部分葡萄植原体黄化病的检测和鉴定技术
• 2.2 第二部分胶东葡萄产区葡萄植原体黄化病调查
• 2.3 第三部分葡萄植原体黄化病的有害生物风险分析和潜在分布区预测
• 2.4 第四部分 SN/T 制标项目和配套试剂盒设计
• 3 参考文献
• 4 附录
• 4.1 附录I 常用溶液的配制
• 4.2 附录II 实验方法和步骤
• 4.3 附录III 常用化学试剂、分子生物学试剂及仪器
• 4.4 附录IV 葡萄植原体黄化病名称正误辩识
• 4.5 附录V 葡萄植原体黄化病的中文译名
• 4.6 附录VI 本研究使用的植原体株系
• 4.7 附录VII 本研究使用的计算机软件
• 5 致谢
• 6 攻读学位期间发表的论文