苏拉明抑制兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的实验性研究

论文摘要

目的:增生性玻璃体视网膜病变（proliferative vitreo- retinopathy,PVR）是引起视力障碍甚至失明的严重眼病之一。孔源性视网膜脱离、眼外伤、糖尿病视网膜病变等疾病是造成PVR的主要原因。PVR是由于视网膜色素上皮细胞（retina pigment epithelial cells, RPE cells）和神经胶质细胞等的过度增生,在玻璃体后面和视网膜表面形成纤维增殖膜,纤维膜广泛收缩可造成牵拉性视网膜脱离（traction retina detachment, TRD）。如果TRD是由于眼球穿通伤后眼内纤维组织过度增生而引起,则称之为外伤性PVR,其是以细胞迁移进入玻璃体和视网膜表面进行增生为基本病理特征。目前,手术治疗虽可有效去除PVR增生膜,但同时也破坏了血-视网膜屏障、血-房水屏障,结果炎症反应重,复发率高。寻求有效的药物辅助治疗是目前研究的方向。虽然已有抗PVR药物的研究报道,但这些药物毒副作用比较大或半衰期比较短,因此,寻求对眼组织无毒副作用和半衰期长的药物来防治PVR具有重要的临床意义。苏拉明具有抑制RPE细胞和神经胶质细胞增生和移行,并参与细胞信号传导的作用。近年,国内外对苏拉明抑制体外培养的RPE细胞的研究已有报道,但对防治外伤性PVR的研究尚未见报道。本实验通过采用自体富含血小板血浆玻璃体腔注射,创建一种可行的兔外伤性PVR模型,同时玻璃体腔内注射不同浓度苏拉明。采用双抗夹心ELISA法和放射免疫方法分别检测五组玻璃体液中EGF和TNF-α的含量,观察外伤性PVR模型组和实验组中眼底和视网膜病理的改变,从而探讨苏拉明防治PVR的作用机制,为将来临床应用提供理论依据。方法:选用健康新西兰大白兔40只,雌雄兼用,体重2.5～3.2kg。采用富含血小板血浆玻璃体腔注射制备兔PVR模型,随机抽取8只作为空白组,其余36只制备外伤性PVR模型,并随机分为4组,每组8只。分别为模型组:玻璃体腔内一次性注入0.1ml生理盐水;实验1、2、3组:玻璃体腔内一次性注入0.1ml浓度分别为40mg/ml、60mg/ml和80mg/ml苏拉明。分别于术后第1、3、7、14、21、28天在充分散瞳下用裂隙灯显微镜和直接检眼镜观察并记录伤口、角膜、前房及玻璃体视网膜的改变,参照Fastenberg评级标准进行分级,并进行眼底照相及眼B超检查,采用双抗夹心ELISA法和放射免疫方法分别检测玻璃体液中EGF和TNF-α的含量。实验数据采用SPSS13.0统计软件包进行统计分析,PVR分级情况采用秩和检验,P<0.05作为显著标准。抽取玻璃体标本后立即摘除眼球,取伤口附近视网膜组织标本常规进行HE染色、显微镜观察和照相。结果:1.用裂隙灯显微镜、眼底镜观察玻璃体视网膜改变,并按Fastenberg评级标准记录。第1、3、7天时实验1、2、3组玻璃体视网膜增生相对较缓慢,其增生级别与模型组比较,统计上无显著性差异（P>0.05）。术后第14天,实验3组的增生级别明显低于模型组,两者比较有显著性差异（秩和检验P<0.05）,其余组之间无显著性差异。术后21、28天实验1、2、3组的平均增生级别均低于模型组,与模型组比较有显著性差异（秩和检验P<0.05）。实验2、3组的平均增生级别低于实验1组,与实验1组比较有显著性差异（秩和检验P<0.05）。实验2、3组之间比较无显著性差异（秩和检验P>0.05）。组织学检查,苏拉明实验三组均未发现明显的视网膜形态改变。2.第28天,五组玻璃体中TNF-α和EGF含量进行比较。实验1、2、3组玻璃体腔中TNF-α和EGF含量均低于模型组,有极显著性差异（P<0.01）。实验1、2、3组玻璃体腔中TNF-α的含量均高于空白组,有显著性差异（P<0.01或p<0.05）。实验1组玻璃体腔中EGF的含量高于空白组,有极显著性差异（P<0.01）。实验2、3组玻璃体腔中EGF的含量与空白组无显著性差异（P>0.05）。实验2、3组玻璃体腔中TNF-α和EGF含量均低于实验1组,有显著性差异（P<0.01或P<0.05）。实验2、3组间玻璃体腔中TNF-α和EGF含量无显著性差异（P>0.05）。3. B超结果:第1、3天,模型组及实验组:玻璃体内不同程度的斑点状、絮状或细带状回声,未与球壁回声紧密相连。第7天,模型组及实验组:表现为不均匀的、长短不一、走行不规则的回声带,或与其平行、弯曲,与球壁单一接触时有明显后运动,有多个粘连点时后运动不显著,大多不与视乳头连接。第14天,模型组:玻璃体内不同形状较粗条带状中强回声,与视乳头相连;实验组:玻璃体腔内可探及形态不规则的中强回声光斑,不与眼球壁相连,有明显的后运动。第21天,模型组:玻璃体腔内可探及聚集成片的强回声光斑及条状强回声光带,与眼球壁单一接触的有明显后运动;实验组:玻璃体内见块状或膜状回声及少量带状回声,少量走行不规则回声带,不与眼球壁相连,有明显后运动。第28天,模型组:玻璃体内弧形带状强回声,与球壁相连或与视乳头相连的条带,转动眼球时,光带轻度震颤或呈“V”形脱离尖端位于视乳头区,两端连于两侧锯齿缘;实验组:玻璃体腔内可探及不均匀的中强回声光带,不与眼球壁相连。结论:1.随着时间延长,PVR模型组的增生程度发展至更严重等级;苏拉明实验组的增生程度随着浓度的增加而显著性降低。说明苏拉明对外伤性PVR的抑制作用与时间及浓度有关;2.苏拉明实验组玻璃体腔内EGF、TNF-α的含量显著性低于模型组;说明细胞因子在外伤性PVR发病机制中起着重要作用,同时苏拉明能有效抑制兔外伤性PVR的发生和发展;3.形态学表现说明苏拉明玻璃体腔内注射安全,维持药效时间长,对视网膜无明显毒副作用。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 研究论文 苏拉明抑制兔外伤性增生性玻璃体视网膜病变的实验性研究
• 前言
• 材料与方法
• 结果与分析
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 增生性玻璃体视网膜病变的研究进展
• 致谢
• 个人简历