4-芳基香豆素及3,4-二氢-4-芳基香豆素生物活性研究

论文摘要

4-芳基香豆素（4-arylcoumarins）是一类拥有新型生物活性的古老化合物。此类化合物的结构类似于异黄酮又被称作新黄酮,因此有的学者将其划分到黄酮类物质当中。化合物的结构与功能相关,4-芳基香豆素类物质多样的结构赋予了它们丰富的活性。自上世纪50年代发现4-芳基香豆素以来,许多具有抗菌、抗艾滋病病毒、抗肿瘤、抗原虫、抗氧化、抗炎等活性的4-芳基香豆素类衍生物不断被发现。本文研究了编号分别为a～r的12种3,4-二氢-4-芳基香豆素与6种4-芳基香豆素的抑菌活性、抗氧化活性和细胞毒性,并推断相关结构与功能的关系,旨在发掘具有候选药物先导分子作用的4-芳基香豆素类衍生物。主要的研究结果有以下三个方面：抑菌实验结果表明,4-芳基香豆素类衍生物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的生长具有中等强度抑制作用,杀菌活性相对较弱。它们对枯草芽孢杆菌的抑菌活性最强,效果较强的是n样品和h样品,对枯草芽孢杆菌的MIC（有明显抑菌效果的最低样品浓度）值分别为7.3μg.mL-1和14.4μg.mL-1;4-芳基香豆素衍生物对白色念珠菌抑制活性较强的是m样品与n样品,MIC分别是29μg.mL-1和58.5μg.mL-1;抑制金黄色葡萄球菌较好的是h和n样品,MIC均为39μg.mL-1;对大肠杆菌的抑菌效果最弱。体外抗氧化实验结果发现e、f、g、n、p样品对DPPH和ABTS.+自由基的清除活性强于抗坏血酸（Vc）,这些样品化学结构上的共同特点是A环上含有相邻的羟基。与Vc的活性相似,此类物质清除上述两种自由基是一个迅速的过程,反应可以在1min内完成。在以硝普钠（SNP）为NO供体考察样品清除NO的能力,结果显示n样品和o样品具有强于Vc清除能力,它们的ECso值分别为63.8μg.mL-1和26.4μg.mL-1。o样品的清除能力强于白藜芦醇（EC50=54.6μg.mL-1）.推断3’-甲氧基-4’-羟基苯基这一基团可能与4-芳基香豆素清除NO的能力密切相关,因为含有这一基团的o、n、j,表现出了强于其它样品的活性。MTT法测试了芳基香豆素样品的体外细胞毒性。实验结果显示样品i、j、n、o、p、l、r对人胃癌细胞株（BGC-823）的生长具有抑制作用,浓度在31.25mg.L-1时的抑制程度高于50%；其中n样品的抑制能力最强,IC5o值为29.1±1.3μg.mL-1。芳基香豆素样品的体外细胞毒性均低于紫檀芪（IC50=7.3±0.8μg.mL-1）和白藜芦醇（IC50:17.1±1.3μg.mL-1）.以大蜡螟为实验动物,首次考察了芳基香豆素样品的毒性。结果显示样品在浓度范围为12.5～200μg.g-1时对大蜡螟的三龄幼虫几乎没有口服毒性,与对照相比10天内幼虫几乎没有死亡。添加样品后幼虫不会出现厌食效应,食物的平均消耗量正常,食物的消化率正常,幼虫的生长率也正常。芳基香豆素样品以最高注射50μg每头时注射体重为250mg左右的大蜡螟老熟幼虫时毒性不明显,大蜡螟的死亡率为0,低于相同注射量的伞形香豆素和紫檀芪。实验样品（紫檀茋、伞形香豆素、芳基香豆素）在大蜡螟由幼虫变成成虫的过程上有一个明显延缓的现象,这一过程的时间大约会被延缓1天左右,具有推迟发育的样品有e、g、h、j、o、p、m、n、r。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 1. 4-芳基香豆素类物质的分布及生物活性
• 1.1 分布情况
• 1.2 4-芳基香豆素类物质具有的生物活性
• 2. 香豆素类物质的毒性
• 3. 研究目的与意义
• 参考文献
• 第二章 4-芳基香豆素及3,4-二氢-4-芳基香豆素的抑菌活性测定
• 1. 材料方法
• 1.1 实验样品
• 1.2 实验菌株
• 1.3 试剂与仪器
• 1.4 实验方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 样品的抑菌圈情况
• 2.2 样品的MIC值与MBC值
• 2.3 样品的抑菌动力学
• 小结
• 参考文献
• 第三章 4-芳基香豆素及3,4-二氢-4-芳基香豆素的抗氧化活性
• 1. 材料与方法
• 1.1 实验样品
• 1.2 试剂与仪器
• 1.3 实验方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 样品对自由基及NO的清除能力
• 2.2 清除自由基的动力学曲线
• 2.3 样品对SNP生成NO的抑制
• 小结
• 参考文献
• 第四章 4-芳基香豆素及3,4-二氢-4-芳基香豆素的细胞毒性和昆虫毒性
• 1. 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 试剂与仪器
• 1.3 大蜡螟的人工饲养
• 1.4 实验方法
• 2. 结果与分析
• 2.1 样品对BGC-823细胞增殖的抑制
• 2.2 样品的注射毒性
• 2.3 样品的口服毒性
• 小结
• 参考文献
• 全文结论
• 本文创新之处
• 攻读硕士期间发表的论文及获得奖项
• 致谢
• 附件