辛伐他汀对大鼠外伤性颅脑损伤后神经细胞凋亡、Caspase-3表达及脑含水量的影响

论文摘要

目的:外伤性脑损伤是患者致残和死亡的常见原因,寻找理想的神经保护剂,对于减少颅脑外伤患者死亡率和病残程度具有重要意义。外伤不仅瞬间造成原发性脑损伤,而且在伤后几小时到数天还可出现继发性脑损伤,而后者是外伤后脑损害的重要表现形式,也是临床进行脑保护治疗的作用点。近年来研究证明细胞凋亡参与了继发性脑损伤病理生理演变的全过程。在暴力直接作用的伤灶皮质,神经细胞的病理改变以坏死为主,而在外力打击相对较轻的伤灶周围部位,即“损伤半暗带区”,神经细胞的损伤是通过细胞凋亡形式完成的。“损伤半暗带区”处于动态变化过程,在有利条件下,“损伤半暗带”区可转化为正常细胞区（时限性可逆）,在不利情况下可转化为坏死区（不可逆转）,并对其周围脑组织产生损害,使损伤进一步加重。细胞凋亡的发生是一个由caspase家族成员介导的蛋白酶级联反应过程,该家族成员caspase-3是哺乳动物细胞凋亡中的关键蛋白酶,它的活化预示着细胞凋亡执行阶段的开始。本研究拟通过观察辛伐他汀对大鼠外伤性颅脑损伤后神经细胞的凋亡、Caspase-3蛋白表达、脑组织含水量变化的影响,从而探讨辛伐他汀对继发性脑损伤是否具有保护作用。方法:健康成年雄性SD大鼠36只随机分为三组（n=12）①辛伐他汀组:采用液压打击法建立脑挫裂伤大鼠模型,于术日大鼠清醒后,用2ml生理盐水溶解辛伐他汀20mg/kg体重,行胃内灌注,每日一次;②生理盐水组:自术日起用等量的生理盐水对该组脑挫裂伤模型行胃内灌注;③假手术组:受试动物仅作颅骨钻孔而不致伤,并给予等量的生理盐水行胃内灌注。所有受试动物于伤后72小时麻醉后断头取脑,取脑挫裂伤灶周边前部“半暗带”脑组织（200±50）mg,干湿重比法分别测量各组脑组织含水量;后部“半暗带”标本及海马区供组织学、Caspase-3蛋白表达和细胞凋亡研究。假手术组取相应部位脑组织进行对照研究。结果:1.辛伐他汀对大鼠外伤性颅脑损伤后72h脑挫裂伤灶周边“半暗带区”脑组织含水量的影响:辛伐他汀治疗组、生理盐水组和假手术组“半暗带区”脑含水量分别为（79.72±1.81） %、（86.21±1.44）%和（73.66±1.2）%;生理盐水组与假手术组水肿显著增多（P<0.05）;辛伐他汀治疗组较生理盐水组显著减少（P<0.05）,但仍多于假手术组（P<0.05）。2.原位TUNEL标记法细胞凋亡检测:假手术组仅有极少数神经细胞呈TUNEL阳性。颅脑损伤后皮质半暗带及伤侧海马组织出现大量TUNEL染色阳性细胞,凋亡指数分别为（22.72±4.0）%、（11.80±1.47）%,假手术组凋亡指数分别为（0.87±0.17）%、（0.2±0.08）%。和假手术组的皮层及海马比较有显著差异（P<0.05）。辛伐他汀组皮质半暗带及伤侧海马组织较生理盐水组相比,凋亡细胞均明显减少（P<0.05）,凋亡指数分别为（18.29±2.38）%、（7.07±1.04）%。但仍多于假手术组（P<0.05）。3. Caspase-3蛋白的表达:脑组织中Caspase-3阳性表达细胞在颅脑损伤后显著增加,以皮质半暗带及海马区域最为明显。辛伐他汀治疗可明显抑制颅脑损伤后Caspase-3的表达,辛伐他汀组在皮质半暗带及海马区域Caspase-3阳性细胞数分别为17.91±2.01、8.61±1.70。生理盐水组相应位置Caspase-3阳性细胞数分别为23.85±3.40、12.89±1.96。较生理盐水组相比,Caspase-3表达均明显减少（P<0.05）。辛伐他汀组、生理盐水组较假手术组比Caspase-3表达均明显增多（P<0.05）。结论:辛伐他汀可显著减少大鼠大脑挫伤灶周围“半暗带区”脑组织水肿;抑制“半暗带区”及海马区域的神经细胞凋亡。辛伐他汀的这种神经保护作用是通过抑制caspase-3表达而实现的。

论文目录

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• 研究论文 辛伐他汀对大鼠外伤性颅脑损伤后神经细胞凋亡、Caspase-3 表达及脑含水量的影响
• 前言
• 材料与方法
• 结果
• 附图
• 附表
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述 颅脑外伤后继发性脑损伤发病机制研究进展
• 致谢
• 个人简历