槲皮素对人大肠癌SW480细胞侵袭及转移作用的体外实验研究

论文摘要

目的:探讨槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞侵袭及转移能力的影响。方法:观察不同浓度（5、10、20、40、80、160μmol/L）的槲皮素及阳性对照组5-Fu（50mg/L）在24、48及72小时对人结肠癌SW480细胞增殖的影响,分别在光学显微镜和电子显微镜下检测槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;运用细胞计数试剂盒检测法（CCK-8）测定不同浓度槲皮素对人结肠癌SW480细胞生长的影响;使用流式细胞仪检测细胞周期及凋亡的情况;利用粘附实验检测各组细胞的粘附率;利用Transwell小室实验检测各组细胞侵袭运动的能力;通过明胶酶谱分析法检测各组细胞基质金属蛋白酶的分泌水平。结果:光学显微镜和电子显微镜下观察到经槲皮素处理的人结肠癌SW480细胞较阴性对照组细胞数量减少,部分细胞的体积缩小,细胞膜完整,胞浆浓缩,核染色质固缩,细胞核碎裂,形成凋亡小体;CCK-8法检测显示槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且其抑制作用随着处理药物浓度的增加和作用时间的延长而增强;流式细胞仪分析结果显示,随着槲皮素处理浓度的增加,SW480细胞的凋亡率逐渐增高,不同浓度槲皮素作用72h的结果显示该药物能呈浓度依赖性地诱导SW480细胞凋亡,且主要将细胞阻滞在G2/M期;粘附实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞的粘附能力,且随着药物浓度的增加,粘附率逐渐下降;Transwell实验证明槲皮素能明显抑制结肠癌SW480细胞侵袭及转移能力,且随浓度增加,抑制作用增大;明胶酶谱分析实验发现,槲皮素有抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌的作用,且随着药物浓度的增加,分泌的基质金属蛋白酶逐渐减少。结论:在体外研究中,槲皮素能够有效抑制人结肠癌SW480细胞的生长增殖、粘附、侵袭和转移的能力,并呈时间和剂量依赖性;同时能够诱导结肠癌SW480细胞凋亡的发生,并阻滞细胞周期的进展。并且从分子水平上证明,槲皮素抑制SW480侵袭转移能力可能与其抑制基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9分泌有关。所以槲皮素是一种潜在的抗结肠恶性肿瘤侵袭和转移的药物。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 符号表 （缩略语）
• 第1章 前言
• 1.1 大肠癌
• 1.2 肿瘤的侵袭和转移
• 1.3 细胞凋亡
• 1.4 抗肿瘤药物的开发
• 1.5 槲皮素
• 1.6 研究目的和内容
• 第2章 实验研究
• 2.1 实验技术路线
• 2.2 实验材料
• 2.2.1 细胞株
• 2.2.2 实验试剂
• 2.2.3 一般性耗材
• 2.2.4 主要仪器设备
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 主要试剂配制
• 2.3.2 细胞培养
• 2.3.3 CCK-8增殖实验
• 2.3.4 形态学观察
• 2.3.5 细胞凋亡检测
• 2.3.6 粘附实验
• 2.3.7 TRANSWELL小室侵袭实验
• 2.3.8 明胶酶谱分析实验
• 2.3.9 统计分析
• 第3章 实验结果
• 3.1 CCK-8法检测SW480 细胞增殖抑制率
• 3.2 槲皮素对人结肠癌SW480 细胞形态结构的影响
• 3.2.1 光镜下观察
• 3.2.2 电镜下观察
• 3.3 槲皮素对人结肠癌细胞SW480凋亡及细胞周期的影响
• 3.4 槲皮素对SW480 细胞粘附能力的影响
• 3.5 槲皮素对SW480 细胞侵袭运动能力的影响
• 3.6 槲皮素对SW480 细胞分泌金属蛋白酶的影响
• 第4章 讨论
• 第5章 结论
• 参考文献
• 文献综述
• 参考文献
• 致谢
• 论文发表
• 本人简历