人卵巢癌细胞系具有不同转移潜能亚系的分离和鉴定及体外腹膜模型的建立

论文题目: 人卵巢癌细胞系具有不同转移潜能亚系的分离和鉴定及体外腹膜模型的建立

论文类型: 博士论文

论文专业: 妇科肿瘤

作者: 陈洁

导师: 汤春生

关键词: 卵巢肿瘤,肿瘤浸润,细胞系,克隆,小室,整合素

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 研究背景卵巢癌高居妇科恶性肿瘤死亡率之首,其易于腹腔广泛播散转移的特性正是其发现晚、死亡率高的关键。目前关于卵巢癌腹腔播散机制的研究较少,主要原因是缺少合适的转移性瘤细胞系和合适的体外腹膜粘附模型。所谓转移性瘤细胞系(metastatic cancer cell line)是指具有确切转移潜能的瘤细胞系。一般实验室建立的瘤细胞系,虽有些具有转移潜能,但大部分仍缺乏该表型特征。早在1977年Fidler和Kripke就提出了肿瘤细胞群体异质性的实验证据和理论,据此理论可从同一肿瘤母系中分离出遗传背景完全相同的单克隆细胞亚系,此亚系能做到异质性最低,对于研究肿瘤转移机制和克隆肿瘤转移相关基因均具有重要意义。马丁的研究指出人浆液性卵巢癌细胞系(SKOV3)虽是低转移属性的细胞株,但其中也含有部分较强转移潜能的细胞亚群。我们利用SKOV3细胞株的这一特性,分离出具有不同转移潜能的亚系,并对其侵袭转移能力进行体内外鉴定。关于体外腹膜模型,国外多采用体外培养的间皮细胞为粘附模型,缺少间皮细胞紧密排列在基底膜上的正常结构;而国内多采用人工基底膜(Metrigel)、LN、FN等细胞外基质,缺少了重要的腹膜间皮细胞。亦有采用大鼠或小鼠腹膜模型的报道。但无疑人的腹膜体外模型是最理想的,目前已有人子宫内膜体外腹膜粘附模型的报道,但尚无用于卵巢癌粘附机

论文目录:

中文摘要

ABSTRACT

中英文缩略词表

第一部分卵巢癌细胞系SKOV3具有不同转移潜能的克隆化亚系的分离

一、有限稀释法分离SKOV3细胞克隆株

二、单细胞克隆株电泳率的测定

三、流式细胞仪检测单细胞克隆株的细胞周期

第二部分 SKOV3不同转移潜能克隆株侵袭转移能力的体内

一. 生长曲线观察

二. 软琼脂培养克隆形成实验

三. 体外侵袭及移动实验

四. 裸鼠异种接种及自发转移试验

五. 细胞克隆株稳定性实验

第三部分卵巢癌细胞与腹膜粘附机制的初步研究

一. 体外腹膜模型的建立

二. 流式细胞仪测S1、S14细胞表面蛋白整合素β1的表达

三. 抗整合素β1单抗对癌细胞粘附特性的影响

参考文献

附图表

致谢

学习期间发表论文

发布时间: 2005-10-17

参考文献

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人卵巢癌细胞系具有不同转移潜能亚系的分离和鉴定及体外腹膜模型的建立

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