脂肪来源的Flk1+间充质干细胞向中胚层分化过程中microRNA的表达

论文摘要

目的检测目的microRNA和mRNA在间充质干细胞向中胚层分化（成脂、成骨、内皮）过程中的表达变化,并探讨microRNA可能参与调控的信号通路。方法根据生物信息学筛选microRNA,并预测其靶基因。从人脂肪组织中提取间充质干细胞并向成脂、成骨、内皮三个方向诱导分化,检测诱导分化过程中目标microRNA和可能靶基因及相应蛋白的表达变化,根据变化结果分析其可能参与调节的信号通路。结果初步筛选了miR-Z、miR-K、miR-M,预测了它们可能参与的四条信号通路Wnt/β-catenin、BMP/Smad、PI3K/Akt和Notch信号通路。在各系诱导分化过程中,miR-K和miR-M的表达变化分别与PI3K/Akt和Notch信号通路的调控作用相符合。结论筛选出了miR-K与PI3K/Akt信号通路中Akt1基因以及miR-M与Notch信号通路中Notch1基因这2对在结构预测、表达变化均相符合的可能作用位点。为进一步验证缩小了范围,并提供了前体条件。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 材料和方法
• 一.试验材料
• 二.试验仪器
• 三.试验方法
• 结果
• 一 microRNA和靶基因预测结果
• 二 脂肪来源间充质干细胞诱导分化观察和鉴定
• 三 has-miR-Z,has-miR-K和has-miR-M在成脂、成骨、内皮三系诱导中表达变化（RT-PCR和Real-time PCR结果）
• 四 成脂、成骨分化过程中部分基因mRNA表达变化
• 五 成脂、成骨分化过程中β-catenin蛋白的表达变化（Western Blot结果）
• 讨论
• 一 microRNA选择和靶基因预测
• 二 脂肪来源间充质干细胞三系分化的诱导体系评价
• 三 Wnt/β-catenin,BMP/Smad、PI3K/Akt和Notch信号通路与miR-Z、miR-K、miR-M在中胚层分化过程中关联的可能性探讨
• 四 后续工作方向
• 参考文献
• 综述 参与调控成体干细胞成脂分化的基因和信号通路
• 综述参考文献
• 致谢