论文摘要
本课题以霍乱弧菌特异性的霍乱肠毒素A亚单位基因（ctxA）、毒素协同调节菌毛A基因（tcpA）和全DNA序列为目标,通过聚合酶链反应（PCR）技术、限制性内切酶技术、脉冲场凝胶电泳技术和BioNumerics V4.0软件UPGMA方法进行聚类分析,观察了来源于重庆市1992年至2006年的疫情和环境检测样本的94株霍乱弧菌核酸分子特征。着重探索霍乱暴发疫情分离的菌株与菌株之间,疫情分离的菌株与海、水产品监测分离的霍乱弧菌之间的遗传相关性,推断疫情菌株的来源、变迁及分子指纹图谱变化规律,以期为预测疫情和制定防治措施提供依据。研究结果显示:1、94株霍乱弧菌样本（83株感染者样本,11株环境样本）中ctxA基因阳性检出92株（97.87%）,2株水产品市场监测分离菌株为阴性;tcpA基因阳性检出91株（96.81%）,2株水产品市场监测分离菌株和1株来源于病人的分离株为阴性。2、94株霍乱弧菌被分为44种脉冲场凝胶电泳图谱,聚类分析将大部分菌株分为三类（小川型,稻叶型,O139群）。3、2002年重庆市部分区县多点暴发霍乱疫情埃尔托稻叶型1d霍乱弧菌菌株基因同源性较高;1992-2006年重庆市埃尔托小川型和埃尔托稻叶型相似系数仅为75%;从甲鱼分离的O139群霍乱弧菌与同期流行的O139群霍乱弧菌优势菌株的脉冲场凝胶电泳图谱型别一致,并且也为产毒株。由此可见,1992-2006年重庆市霍乱弧菌流行株存在紧密相关的核酸分子特征;经过长期的霍乱流行后埃尔托霍乱弧菌主要向小川型和稻叶型分化,两型分子特征差异较大;甲鱼中分离的O139群霍乱弧菌与霍乱疫情分离菌株之间高度同源,被污染的甲鱼可能是近年来食源性霍乱暴发的主要传染来源之一,提示:海、水产品的监测应当是霍乱防控的重点。
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