银杏叶提取物对锂-匹罗卡品癫痫大鼠干预作用的研究

论文摘要

背景:癫痫是常见程度仅次于中风的神经疾患,癫痫的高发病率及病死率使如何防治癫痫成为一个需要尽快解决的课题。现有的抗癫痫药物由于其作用单一且副作用大等原因,不能彻底地预防和治疗癫痫。预防和治疗癫痫应该从多方面进行干预。银杏叶提取物（Ginkgo biloba extract,GBE）含有多种成分,可作用于多个靶点,可能更有效地防治癫痫。目的: 本实验采用锂-匹罗卡品癫痫（ Lithium-Pilocarpine Seizures,LPS）大鼠模型,分别经预处理和急性给药两种给药模式,通过观察GBE 对致痫大鼠的行为学、脑电图（electroencephalogram,EEG）及小脑神经元和小胶质细胞反应性的影响来评估GBE 对癫痫的干预作用,并对其可能的作用机制进行探讨。期望对癫痫的临床预防和治疗提供一种更安全有效的药物并为银杏叶制剂用于临床上癫痫的防治提供实验依据和指导。方法:以健康成年雄性Sprague-Dawley 白色大鼠为研究对象。所有药物均经腹腔注射。120 只大鼠随机分成5 组:生理盐水对照组（n=6）;GBE 单独给药对照组（n=6）;LPS 组（n=36）;GBE 预处理组（n=36）;GBE 急性给药组（n=36）组。后三组根据处死时间不同,再分为6 个亚组:即给予匹罗卡品后3 小时（3h）、1 天（1d）、3 天（3d）、7 天（7d）、14 天（14d）和60 天（60d）,每个亚组6 只大鼠。记录各组大鼠行为学和EEG 变化并对其小脑组织进行Nissl 染色和c-Fos 蛋白免疫组化染色和同工凝集素B4（GSA-B4）免疫组化染色。结果: 1.行为学:生理盐水对照组和GBE 单独给药对照组均为0 级;LPS 组、GBE 预处理和GBE 急性给药组的4 级以上发作率分别为91.67%、5.56%和86.11%;死亡率分别为11.11%、0 和8.33%;站立发作潜伏期分别为30.38±12.01 分钟、95.00±46.67 分钟和30.75±12.92 分钟。与LPS 组相比,GBE 预处理组的4 级以上发作率和发作分级明显降低。GBE 预处理的预防有效率为94.44%,GBE 急性给药的治疗有效率为35.48%。2.EEG:生理盐水对照组和GBE 单独给药对照组大鼠EEG 正常。LPS 组大鼠EEG 可见频率增快和/或波幅增高,多个棘波或阵发性连续棘波群发放。绝大多数GBE 预处理组大鼠EEG 仅见频率增快,而无棘波发放。GBE 急性给药组大鼠EEG 与LPS 组类似。3.病理形态学（1）Nissl 染色:与生理盐水对照组相比LPS 组、GBE 预处理组和GBE 急性给药组小脑均未见明显神经元脱失。（2）c-Fos 免疫组化染色: （3）免疫组化染色:生理盐水各实验组小脑均无c-Fos 阳性细胞表达。对照组和GBE 单独给药组大鼠小脑各脑叶均没有GSA-B4阳性细胞表达。LPS 各亚组同一时间点大鼠小脑各脑区、各组织学分区的GSA-B4阳性细胞表达无差别。与LPS 组相比,GBE 预处理组和GBE急性给药组各时间点小脑GSA-B4阳性细胞数明显减少,GSA-B4阳性细胞胞浆平均光密度明显增高。结论: 1.LPS 大鼠模型具有三个按时间顺序出现的不同的时期,具有操作简单、成功率高、易于观察、价格低廉等特点,是用于人类颞叶癫痫发病机制和抗癫痫药物研究的理想动物模型。

论文目录

• 一、论文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 实验材料
• （五） 实验方法
• （六） 实验结果
• （七） 讨论
• （八） 结论
• （九） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 正文
• （二） 参考文献
• 三、致谢