大豆肽的分离及其生理功能鉴定

论文摘要

大豆生理活性肽是大豆蛋白经蛋白酶水解后生成的大豆多肽和氨基酸的混合物,其氨基酸组成和大豆蛋白质基本相同,相比于大豆蛋白质溶解度低,有一定的抗原性,消化率和生物效价低等限制实际应用生产的特点,大豆肽的优势显得尤为明显,它易于被人体消化吸收,而且具有多种生理功能,如抗氧化性、降血压、降低胆固醇含量和预防骨质疏松等,可作为功能性成分在乳品、饮料、糖果等食品体系中加以利用。本课题在实验室原有的低分子大豆多肽生产工艺基础上,进行优化,通过超滤分离后,获得所需分子量大小的混合肽,并对所获得的大豆多肽在抗肿瘤活性、降血脂活性、抗氧化活性、抗疲劳活性等方面的作用进行了研究,旨在为大豆多肽的工业化生产提供理论依据,也为进一步研究开发其营养保健功能提供证据。具体研究结果如下：1.研究了大豆肽的抗氧化活性作用,通过葡聚糖凝胶G-25,进行凝胶层析实验,收集到了3个峰,并对比Tricine-SDS-PAGE图谱分析其分子量区间。结果表明相同浓度下,在一定的分子量范围内,大豆肽的抗氧化活性随着分子量的减小的增强,采用邻苯三酚自氧化法,低分子量的大豆肽自氧化变化率比空白对照组变化率减少52.28%。2.研究了大豆肽的减肥降血脂作用,结果表明,低剂量大豆肽具有的减肥降血脂效果好于中、高剂量。随着大豆肽剂量在一定范围内增加,减肥和降血脂效果会呈正相关。本实验大豆肽样品采用新型发酵工艺制备,通过微生物发酵和酶解相结合的方法,使77.8%的产物分子量分布在538-2659Da范围内,低剂量浓度达到了大豆肽的最大效应,当再增加剂量时,会过多摄入营养物质,导致效应减弱。由于细菌和霉菌产生的蛋白酶种类多,水解大豆蛋白产生的低肽混合物种类也多,产物是多种功能肽的复合体,其具有减肥降血脂活性,是多种功能肽的综合作用。根据灌胃大豆肽的特点可以推断,在分子量低于8KDa的大豆肽中,一定含有具有减肥降血脂功能的生物活性肽。3.研究了大豆肽的抗肿瘤作用,结果表明,经过新工艺获得的大豆多肽含有抗肿瘤的多肽成分,其中不论是灌胃组还是注射组均能在一定浓度下发挥其抗肿瘤功能,并且与阴性对照组相比,均能产生一定的差异性。相对于阴性对照组,注射组效果更好,而灌胃组中,低剂量组的效果更显著。因此可以推断,在分子量低于8kDa的大豆肽中,一定含有抗肿瘤作用的多肽。4.研究了大豆肽缓解小鼠体力疲劳作用,结果表明,新工艺大豆肽能明显延长小鼠负重力竭游泳时间；能显著增加小鼠肝糖元的储备量,能显著提高游泳后小鼠血乳酸的减少速率。新工艺大豆肽有明显的缓解小鼠体力疲劳的作用,而且在高剂量600mg/kg.bw时效果最好。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 1.1 活性肽的研究概况
• 1.2 大豆活性肽的研究历史和现状
• 1.2.1 大豆蛋白与大豆肽
• 1.2.2 大豆肽的发酵工艺
• 1.2.3 大豆肽的分离纯化和分析方法
• 1.2.4 研究内容及方法
• 1.3 研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料、试剂及仪器
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验试剂
• 2.1.3 实验仪器
• 2.2 实验方法
• 2.2.1 溶液的配制
• 2.2.2 大豆肽的制备与分离
• 2.2.3 大豆肽的理化性质
• 2.2.4 大豆肽生理活性的鉴定
• 3 结果与分析
• 3.1 大豆肽的制备与分离
• 3.1.1 胰蛋白酶水解后DH和TCA-NSI的测定
• 3.1.2 大豆肽的分离
• 3.1.3 吸收峰2分子量范围的确定
• 3.2 大豆肽生理活性的鉴定
• 3.2.1 大豆肽抗氧化能力的测定
• 3.2.2 大豆肽降血脂实验
• 3.2.3 大豆肽抗肿瘤试验
• 3.2.4 大豆肽的抗疲劳试验
• 4. 结论
• 4.1 大豆肽的制备与分离
• 4.2 大豆肽的生理活性鉴定
• 4.2.1 大豆肽与抗氧化
• 4.2.2 大豆肽与降血脂
• 4.2.3 大豆肽与抗肿瘤
• 4.2.4 大豆肽与抗疲劳
• 5. 下一步计划
• 参考文献
• 致谢