NF-E2相关因子在烧伤脓毒症大鼠中免疫脏器中的表达

论文摘要

NF-E2相关因子在烧伤脓毒症大鼠免疫脏器中的表达目的探讨Nrf2在烧伤脓毒症大鼠各免疫脏器中的表达规律,初步分析Nrf2在脓毒症发生发展中的可能作用机制。方法将wistar大鼠分为正常对照组、单纯烫伤组、烫伤复合金葡菌脓毒症组和烫伤复合绿脓杆菌脓毒症组。除正常对照组外单纯烫伤组、烫伤复合金葡菌脓毒症组和烫伤复合绿脓杆菌脓毒症组,依不同时相（2小时、8小时、24小时）,分为三个亚组,并于相应时相点,断颈处死大鼠,开腹,无菌操作下分别切取脾脏、肺脏和肝脏:一部分液氮冻存,用RT-PCR检测Nrf2 mRNA表达情况,用Western-Blot检测Nrf2的蛋白质表达情况;另外一部分10%中性甲醛固定,石蜡包埋、切片、行HE染色,然后在光镜下观察组织学改变。结果1.正常大鼠脾、肺、肝组织中均含有少量的Nrf2,在研究的脏器中以肺、脾组织含量丰富,其次为肝脏。2.在观察单纯烧伤组大鼠中各组织Nrf2 mRNA表达均有明显下调,但是在脾组织中其表达在8小时下调至最低值。随着时间的延长在24小时,表达又上调并接近正常对照组的表达值。3.金黄色葡萄球菌所致烫伤脓毒症大鼠脾、肺、肝组织中Nrf2 mRNA表达中只有在肝组织中表达有上调,在肺组织和脾组织中的表达均为下调;且在肝组织中2-8小时呈上调趋势,并于2小时上调至峰值,随着时间的延长在24小时又呈下调趋势。而肺和脾组织则呈下调趋势。Western Blot结果显示,在24小时,脾、肝、肺组织中Nrf2蛋白表达均呈下调趋势。4.绿脓杆菌所致烫伤脓毒症动物脾、肺、肝组织中Nrf2 mRNA表达仅在肝组织2小时表达有上调,而在其余实验观察的病变组织及时相中表达都呈下调趋势。结论1、正常大鼠脾、肺、肝组织中均含有少量的Nrf2,在研究的脏器中以脾、肺组织含量丰富,其次为肝脏。说明Nrf2的分布主要集中在相应的免疫器官中。2、单纯烧伤直接导致Nrf2表达下调,其后逐渐增加,提示Nrf2直接参与了烧伤后免疫应答反应。3、烧伤脓毒症时,机体脾、肺组织中Nrf2表达下调,而在肝组织中早期表达有上调,后期而下调,提示脓毒症时肝组织中大量的毒素蓄积激活了天然免疫应答,其后各免疫器官遭受严重感染打击后,Nrf2表达下调,说明严重感染导致了机体自然免疫反应和氧化应激反应的抑制。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略词
• 前言
• 第一章 材料与方法
• 1 试剂
• 1.1 主要试剂
• 1.2 细菌
• 2 主要试验设备
• 3. 试验方法
• 3.1 病理学观察
• 3.2 RT-PCR实验部分
• 3.3 Western Blot实验部分
• 4 统计学处理
• 5 实验动物模型与分组
• 6 组织标本采集
• 第二章 实验结果
• 1 烧伤脓毒症模型的建立
• 2 组织病理形态学检查
• 3 RT-PCR实验结果
• 4 Western-blot分别检测实验大鼠24h中脾、肺、肝组织中Nrf2的蛋白表达
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 附图
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读学位期间主要的研究成果