HIF-1α对糖尿病细胞表面黏附分子CD18和ICAM-1表达的调节作用研究

论文摘要

研究背景 近年来越来越多的证据显示，糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DRP）早期是一种低度慢性炎症。在这个炎症过程中，白细胞和视网膜血管内皮细胞的黏附是最早期的关键事件。参与这个过程的白细胞，大多数是中性粒细胞。白细胞与血管内皮细胞的黏附依赖于细胞表面黏附分子CD18和细胞间黏附分子—1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）的表达。缺氧诱导因子—1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）是机体适应氧损伤的最重要调节因子。研究发现，HIF-1α也是一个重要的炎症调节因子。在缺氧条件下，可以调控CD18和ICAM-1的表达，抑制缺氧引起的白细胞黏附。但是在早期DRP状态下HIF-1α是否具有对CD18和ICAM-1的调节作用尚不清楚。 目的：研究在早期DRP状态下，HIF-1α对细胞表面CD18和ICAM-1表达以及白细胞和血管内皮细胞黏附的影响，探讨将HIF-1α作为早期DRP药物治疗靶点的可行性。 方法：（1）收集不同阶段DRP病例和健康对照者。用流式细胞仪检查受试者外周血中性粒细胞表面CD18的表达。并通过广义线性模型和多元线性回归分析CD18的平均荧光强度（mean channel fluorescence，MCF）和DRP临床分期及各项生化指标的关系；（2）收集上述受试者血清及外周血中性粒细胞，用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbant assay，ELISA）和Real-time PCR分别检测血清中ICAM-1的浓度和中性粒细胞CD18 mRNA水平。通过免疫组织化学和Western blot检测中性粒细胞HIF-1α蛋白水平。研究HIF-1α蛋白与前两者的Spearman相关系数；（3）

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言和文献回顾
• 正文
• 1 糖尿病视网膜病变患者外周血中性粒细胞表面CD18的表达
• 1.1 引言
• 1.2 实验对象、主要试剂、仪器和实验方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 2 DRP患者外周血ICAM-1及中性粒细胞CD18 mRNA和HIF-1α蛋白表达
• 2.1 引言
• 2.2 实验对象、主要材料、试剂和仪器
• 2.3 主要方法
• 2.4 结果
• 2.5 讨论
• 3 HIF-1α反义寡核苷酸对糖尿病血清刺激条件下HL60细胞表达CD18和RF／6A细胞表达ICAM-1的调节
• 3.1 引言
• 3.2 主要材料、试剂和仪器
• 3.3 实验设计及主要实验方法
• 3.4 结果
• 3.5 讨论
• 4 HIF-1α反义寡核苷酸对糖尿病大鼠中性粒细胞CD18表达和视网膜白细胞黏附的影响
• 4.1 引言
• 4.2 主要材料、试剂和方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 附录
• 研究成果
• 致谢