小檗碱对小鼠淋巴细胞的药理作用及其机制的研究

论文摘要

目的: 通过分析小檗碱（berberine,Ber）对小鼠淋巴细胞及其亚群的增殖和细胞周期的影响,以及对二硝基氟苯（dinitrofluorobenzene,DNFB）诱导的小鼠迟发型超敏反应（delayed type hypersensitivity,DTH）的药理效应,从细胞和分子水平探讨Ber免疫抑制作用的机制。 方法: 1.分离小鼠淋巴结细胞,加入多克隆刺激剂刀豆蛋白（concanavalin,Con A）或者二丁酸佛波酯（phorbol 12,13-dibutyrate,PDB）和离子霉素（ionomycin,Ion）进行刺激。以WST-1检测淋巴细胞的增殖情况;用碘化丙锭（propidium iodide,PI）染色分析细胞周期分布;细胞凋亡以Annexin-Ⅴ染色进行分析。 2.分离小鼠淋巴结细胞,以羧基荧光素二乙酸琥珀酰亚胺酯（carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE）染色,加入多克隆刺激剂或者PDB和Ion进行刺激,以PE-anti-mouse CD3、Cy-Chrome-anti-mouse CD4染色,以流式细胞仪分析Ber对T淋巴细胞以及CD4+T淋巴细胞体外增殖的影响。 3.采用0.5%DNFB腹部致敏,耳廓激发的方法建立小鼠DTH模型。激发

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 1.小檗碱对免疫系统作用的研究回顾及现状
• 1.1 对迟发型超敏反应和炎症反应的影响
• 1.2 对炎症因子的作用
• 1.3 对T细胞的活化与增殖影响
• 1.4 对T细胞分化的影响
• 1.5 对移植的影响
• 1.6 对自身免疫性疾病的抑制作用
• 2.PKCθ在T细胞活化信号转导中的核心作用
• +T细胞及其功能'>3.CD4⁺T细胞及其功能
• 4.迟发型超敏反应（delayed type hypersensitivity，DTH）的机制
• 5.T细胞体外增殖的评价指标
• 6.本课题的研究目的和意义
• 参考文献
• 第一部分：小檗碱对淋巴细胞体外增殖和细胞周期的影响
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 结果
• 1.4 讨论
• 参考文献
• 第二部分：小檗碱对T淋巴细胞及其亚群体外增殖的影响
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果
• 2.4 讨论
• 参考文献
• 第三部分：小檗碱对DNFB诱导的小鼠迟发型超敏反应的影响
• 3.1 材料
• 3.2 方法
• 3.3 结果
• 3.4 讨论
• 参考文献
• 第四部分：小檗碱对PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响
• 4.1 材料
• 4.2 方法
• 4.3 结果
• 4.4 讨论
• 参考文献
• 总结
• 附录
• 致谢