通脉醒脑滴丸入血成分分析及透血脑屏障研究

论文摘要

随着社会生活方式的改变以及人口老龄化,心脑血管疾病已是威胁人类健康的最大疾病之一。中医的整体观和辨证论治、中药及其复方的化学成分复杂性和作用机制多样性,使中药及其复方在缺血性脑中风的治疗上有独到之处。通脉醒脑滴丸（简称CD）是以灯盏细辛有效部位、川芎有效部位等研制而成的治疗缺血性脑中风的创新中药。但是,由于其药效物质基础不清楚,使质量控制上存在一定的问题。目的:本文以吸收、分布、代谢为切入点,阐释通脉醒脑滴丸治疗缺血性脑中风的药效物质基础。方法:1采用HPLC梯度洗脱法进行了通脉醒脑滴丸入血成分分析,在此基础上以主要入血成分为指标,进行了通脉醒脑滴丸药物动力学研究,采用DAS2.1.1统计软件拟合药物动力学参数。2采用MTT微量自动比色法,研究了野黄芩苷及川芎有效部位对体外培养大脑皮层神经细胞存活率的影响。3采用脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养模拟血脑屏障的方法,进行了透血脑屏障化学成分研究。结果:1大鼠灌胃给药后,主要入血成分为野黄芩苷,药时曲线呈现二室开放模型,T1/2为2.925±0.706 h,Tmax为4.400±0.548 h,Cmax为0.638±0.260 mg·L-1,AUC（0-18h）为4.528±2.18 mg·L-1·h,CL/F为3.140±1.910 L·h-1·kg-1,V1/F为1.404±1.306 L·kg-1,MRT（0-18h）为7.187±1.055 h。2与空白对照组比较,野黄芩苷仅在较高浓度时能促进细胞体外存活（P＜0.01）,而川芎有效部位较低浓度时能明显促进细胞存活（P＜0.01）,证明川芎有效部位及通脉醒脑滴丸中藁本内酯能透过血脑屏障,进入脑组织,起到脑神经保护的作用3藁本内酯能透过体外培养血脑屏障模型,野黄芩苷不能透过,并且复方中藁本内酯的透过率,比单独使用川芎有效部位,藁本内酯透过率提高了近40%,提示复方配伍应用后,可能促进了血脑屏障开放,提高了藁本内酯的透过率,结论:本文通过对通脉醒脑滴丸入血成分分析及透血脑屏障研究,揭示了通脉醒脑滴丸药物动力学性质,初步阐释了通脉醒脑滴丸治疗缺血性脑中风的药效物质基础,为制定科学合理的质量控制标准奠定了科学的理论基础。创新性:本文采用脑微血管内皮细胞与星形胶质细胞共培养模拟体外培养血脑屏障的方法,预测通脉醒脑滴丸有效成分能否透过血脑屏障,建立了有效、快速筛选中药中具有透血脑屏障的化学成分的方法,有助于揭示中药及其复方治疗缺血性脑中风的药效物质基础及作用机制。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 目录
• 英文缩写词对照表
• 引言
• 正文
• 第一章 通脉醒脑滴丸入血成分分析
• 1 通脉醒脑滴丸入血成分分析
• 1.1 材料与仪器
• 1.2 实验方法
• 1.3 实验结果
• 1.4 讨论
• 2 通脉醒脑滴丸药物动力学研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 第二章 野黄芩苷、川芎有效部位对体外培养大脑皮层神经细胞存活率影响实验
• 1 材料与仪器
• 1.1 试药与试剂
• 1.2 实验动物
• 1.3 实验仪器
• 2 实验方法
• 2.1 操作步骤
• 2.2 MTT微量自动比色法
• 3 实验结果
• 3.1 形态学观察
• 3.2 NSE免疫组化染色检查
• 3.3 大脑皮层神经细胞活性测量
• 4 讨论
• 第三章 通脉醒脑滴丸透体外血脑屏障化学成分研究
• 1 体外血脑屏障模型建立
• 1.1 仪器与材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 实验结果
• 1.4 讨论
• 2 通脉醒脑滴丸透血脑屏障化学成分研究
• 2.1 材料与仪器
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果
• 2.4 讨论
• 第四章 总结与讨论
• 1 总结
• 2 讨论
• 致谢
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果