青鳉蛋白质精氨酸甲基化酶基因的克隆及其表达模式

论文摘要

甲基化是细胞中一种普遍而重要的修饰方式,它在基因表达调控、细胞增殖、发育、DNA修复等方面起着重要的作用。PRMT5作为一种主要的蛋白质精氨酸甲基化酶,在果蝇以及小鼠的精子发生过程中起着重要的作用。本研究以青鳉蛋白质精氨酸甲基化酶（PRMT5）基因的保守区设计引物,通过RT-PCR技术,从青鳉cDNA中克隆1905bp基因片段。多重序列比较结果表明,青鳉Prmt5蛋白与斑马鱼Prmt5蛋白的同源性最高为87%。不同组织的RT-PCR检测表明,青鲻prmt5除肾外,其他组织均有不同程度的表达。原位杂交检测结果显示,prmt5在青鳉早期胚胎发育的不同组织均有表达。说明,prmt5作为一母源性的基因,在胚胎发育过程中具有重要意义。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 1.文献综述
• 1.1 鱼类模式生物:青鳉
• 1.2 DNA甲基化
• 1.2.1 DNA甲基化（DNA methylation）
• 1.2.2 DNA甲基化酶
• 1.3 蛋白质精氨酸甲基化酶（Protein arginine methyltransferase,PRMT）
• 1.4 本研究的目的和意义
• 2.材料和方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 主要试剂
• 2.3 实验方法
• 2.3.1 RNA的提取
• 2.3.2 RT-PCR扩增基因cDNA片段
• 2.3.3 纯化PCR产物
• 2.3.4 E.coli感受态的制备
• 2.3.5 目的DNA片段与pGEM-Teasy载体的连接
• 2.3.6 转化
• 2.3.7 序列分析
• 2.3.8 RT-PCR检测基因的组织表达
• 2.3.9 胚胎原位杂交
• 3.结果
• 3.1 青鳉prmt5基因cDNA片段的克隆
• 3.1.1 同源性分析
• 3.1.2 进化树构建
• 3.2 prmt5的组织表达分布
• 3.3 prmt5在早期胚胎发育过程中的表达
• 4.讨论
• 参考文献
• 在校期间论文发表情况
• 致谢