论文摘要
目的：建立Avolix200在小鼠血清和组织中含量的HPLC测定方法,并应用该方法分析其在小鼠体内代谢及组织分布情况,以此来进行其在小鼠体内的药代动力学研究；评价Avolix200在生物体内的安全性。方法：昆明种小鼠在清醒状态下腹腔注射低（50mg/kg）、中（100mg/kg）、局（200mg/kg）三个剂量的Avolix200,分别于给药前和给药后3、6、9、15、20、40、60、90、120、180、240、300min摘眼球取血,分离血清,小鼠血清用乙腈沉淀蛋白后直接进样。采用RP-HPLC法,以A：磷酸水溶液（pH3.0）,B：乙腈为二元流动相,经Intertex C18（150x4.6mm,5μm）色谱柱分离,于波长230nm处测定血清中Avolix200的含量,根据测定结果绘制Avolix200血药浓度-时间曲线并分析其在小鼠体内代谢的药代动力学参数。昆明种小鼠在清醒状态下腹腔注射低（50mg/kg）、中（100g/kg）、高（200mg/kg）三个剂量的Avolix200,分别于3、6、9、15、40、60、120min处死小鼠,取小鼠脏器（心,肝,肺,肾）,按照100mg:1ml的比例加入生理盐水,制备组织匀浆,3000r/min离心10min后取上清,处理方案和色谱条件同血清样品,测定各组织中Avolix200含量。通过预实验探索出Avolix200的最大和最小致死量,算出各组的给药剂量,腹腔注射不同浓度的Avolix200,观察14天,记录各小组的死亡情况,计算出Avolix200的LDso。结果：Avolix200以50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg腹腔注射给药后,血中能迅速检测到Avolix200,其在小鼠体内的药时过程符合非线性药代动力学过程,在房室模型的拟合上,符合开放一房室模型,其药代动力学参数Ti/2分别为17.022±3.219,30.543±21.722,80.707±22.016,AUC（o-t）分别为7801.811±2360.704,16589.066±5383.58和56898.879±12153.475mg/L/min,三个剂量之间T1/2比较有统计学差异(P<0.01夕,AUC（o-t）随剂量增加而明显增大,并且与剂量不成比例；小鼠以50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg腹腔注射Avolix200后,主要脏器组织（心、肝、肺、肾）均能迅速检测到Avolix200,随着给药剂量的增加,组织中达到最大药物浓度的时间延长；低中剂量各组织中药物浓度无明显统计学差异,高剂量时在肺内的浓度最高,与其它组织比较差异有统计学意义。Avolix200的半数致死量为771.73mg/Kg, LD50的95%可信度期间为729.73～816.15mg/Kg。结论1.本研究建立了小鼠血清及主要脏器组织（心、肝、肺、肾）中Avolix200的HPLC测定方法,能满足研究该化合物在小鼠体内的药代动力学过程。2小鼠以50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg腹腔注射Avolix200后,其代谢过程符合开放一房室非线性药代动力学模型。3.小鼠以50mg/kg,100mg/kg,200mg/kg腹腔注射Avolix200后,能迅速分布到各组织,低中剂量在各组织中的药物浓度无明显统计学差异,高剂量时在肺内的浓度最高。4.Avolix200半数致死量为771.73mg/Kg, LD50的95%可信度区间为729.73～816.15mg/Kg,根据化合物急性毒性分级标准,Avolix200在体内是低毒的。