Sprague-Dawley大鼠海洛因成瘾易感性差异的多巴胺相关机制研究

论文摘要

目的：建立大鼠海洛因成瘾易感性差异的条件性位置偏爱模型,对海洛因CPP易感性差异大鼠伏隔核壳区DA及其代谢产物浓度变化进行动态监测,探讨伏隔核壳区细胞外多巴胺浓度及新奇环境反应性与海洛因成瘾易感性之间的关系。方法：152只雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠分别进行旷场实验以了解其在新奇环境中的反应性,然后随机抽取32为生理盐水对照组（SC）,其余120只大鼠为海洛因处理组进行条件性位置偏爱（CPP）训练,海洛因采取小剂量递增性皮下注射方式,2次/日,起始剂量0.5mg/kg/次,逐日递增0.5mg/kg/次,直至第7天时3.5mg/kg,次。海洛因处理组根据海洛因诱导的CPP强度不同再分为高CPP组（HP）和低CPP组（LP）,各占总数的30%,其中SC组8只,HP、LP组各12只行脑立体定向术,利用微透析技术在活体对大鼠成瘾期（末次海洛因注射后30min）及戒断第1、3、7、14天伏隔核壳区（shell of accumbens nucleus, AcbSH）细胞外DA和DOPAC的变化进行动态检测。微透析样本的检测采用库伦阵列高效液相法。结果：1.海洛因处理前后实验大鼠CPP差值有显著性差异；HP组旷场实验跨格总数及运动总距离均明显高于LP组；各组CPP的差值均与旷场实验结果呈正相关；2.海洛因诱导了大鼠成瘾期AcbSH区DA浓度显著升高及代谢加快,而在戒断早期AcbSH区DA浓度急剧下降,其中戒断第1、3天显著低于对照组；3.HP组在成瘾期DA浓度显著高于LP组大鼠,在所有检测时点HP组DOPAC及DOPAC/DA均显著高于LP组。结论：1.小剂量递增法可以有效的建立海洛因CPP易感性差异模型；2.新奇环境反应性能够较好的预测海洛因依赖的强度；3.海洛因暴露大鼠成瘾期伏隔核壳区DA释放及代谢显著增加,而在戒断早期伏隔核壳区DA浓度急剧下降,并随着戒断的延长而逐渐恢复；4.海洛因高偏爱大鼠有更高的伏隔核壳区DA系统反应性,表现为成瘾期更高的细胞外DA浓度以及戒断后长期存在的DA系统活性升高,这可能是大鼠海洛因成瘾易感性差异的神经生化基础之一。目的：观察高、低海洛因成瘾易感性大鼠中脑腹侧背盖区（ventral tegmental area, VTA）、伏隔核壳区、前额叶皮质（prefrontal cortex, PFC）D2受体（dopamine D2 receptor,D2R）以及多巴胺转运体（dopamine transportor, DAT）的差异及动态变化,进一步探讨海洛因成瘾易感性差异的多巴胺机制。方法：利用免疫组化方法对高、低偏爱组及生理盐水对照组大鼠分别于末次海洛因注射后30分钟、戒断第1、3、7、14各脑区D2R和DAT蛋白表达进行检测。结果：1.海洛因处理后大鼠各检测脑区D2R蛋白表达显著下降,而在戒断后逐渐回升,但在戒断14天后仍显著低于对照组；2.海洛因高偏爱组大鼠在所有检测时点各脑区D2R下调比低偏爱组大鼠更为明显：3.海洛因处理后大鼠各脑区DAT蛋白表达显著下降,戒断后逐渐回升,在戒断7天后与对照组无显著性差异；4.海洛因高偏爱组大鼠各脑区所有检测时点DAT表达与低偏爱组大鼠均无明显差别。结论：1.海洛因慢性处理后,大鼠各成瘾相关脑区D2R出现持续性下调；2.不同个体D2R敏感性或受体水平存在差异,低D2R可能与海洛因成瘾的高易感性与有关；3.海洛因慢性处理后,大鼠各成瘾相关脑区DAT出现持续性下调；4.未发现不同易感性的大鼠DAT蛋白水平存在差异,海洛因成瘾易感性与DAT的表达可能没有直接的相关性。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 海洛因成瘾易感性及新奇寻求与ACBSH区DA的关系
• 1. 前言
• 2 材料与方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 5. 小结
• 第二部分 海洛因易感性差异大鼠成瘾相关脑区DAT蛋白和D2R蛋白的动态变化与区别
• 1. 前言
• 2. 材料与方法
• 3. 结果
• 4. 讨论
• 5. 小结
• 参考文献
• 综述
• 致谢
• 攻读博士期间发表的学术论文及参与的研究