白芸豆中减肥药物α-淀粉酶抑制剂的提纯及其性质研究

论文摘要

α-淀粉酶抑制剂（α—AI）是一种糖苷水解酶抑制剂。从白芸豆中分离纯化的α-淀粉酶抑制剂在医药及农业生产等方面具有广泛地实用价值,尤其在减肥和治疗糖尿病方面有突出的优点。本文以白芸豆为原料,以α-淀粉酶抑制剂为研究对象,设计实验对白芸豆中α淀粉酶抑制剂的提取、分离纯化以及其性质、提取下脚料豆渣的综合利用等进行了相应的研究,并取得了以下成果：1.确定了对白芸豆中分离纯化的α-淀粉酶抑制剂的DNS比色法最佳条件,作为α-淀粉酶抑制剂活性测定的实验分析方法；2.在单因素试验的基础上进行L9（34）正交试验,确定最佳浸提工艺条件为：取过60目筛的白芸豆籽粒粉碎原料100g,按料液比（W／V）1：6加入1.5%NaCl溶液浸提过夜,离心（10 OOOrpm,20min 4℃）取上清70℃水浴15min,冷至室温后离心,上清液加70%乙醇4℃醇沉。并进行验证,α-淀粉酶抑制剂粗品抑制活性均值65%（n=3）；3.对浸提工艺获得的α-淀粉酶抑制剂粗品进行DEAE-Cellulose离子交换树脂柱层析洗脱,获得α-淀粉酶抑制剂样品得率0.37%,抑制活性79.3%；Sephadex G-75凝胶柱层析进一步分离纯化,α-淀粉酶抑制剂产品,得率0.12%,抑制活性90.4%；4.采用PAGE凝胶电泳的考马斯亮蓝染色和麝香草酚法染色,以及Sepharose CL-6B凝胶柱层析,结果表明白芸豆α-淀粉酶抑制剂样品的相对分子量为36kD,且为结构均一的糖蛋白,与文献报道基本吻合；5.分别采用Lowry法（又称Folin-酚试剂法）和苯酚-硫酸法对样品蛋白质和多糖的含量进行测定。参照相应的标准曲线,可得出白芸豆α-淀粉酶抑制剂样品的蛋白质含量为86.7%,多糖含量为13.3%。6.白芸豆中α-淀粉酶抑制剂样品对温度、pH、预温时间的稳定性研究结果显示α-淀粉酶抑制剂耐热性较高,具有很高的应用价值；当pH4.5时抑制活性相对最大；7.白芸豆α-淀粉酶抑制剂对哺乳动物α-淀粉酶有抑制活性,但对微生物的α淀粉酶无抑制活性。体现了白芸豆α-淀粉酶抑制剂的抑制特异性；8.研究了使用豆渣制备膳食纤维的最佳提取工艺条件,提取得可溶性膳食纤维（SDF）的含量为37.8%,并对所制得的SDF进行了一系列的品质测定。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 白芸豆概述
• 1.1.1 白芸豆简介
• 1.1.2 白芸豆的实用价值
• 1.2 α-淀粉酶抑制剂的研究概述
• 1.2.1 α-淀粉酶抑制剂的特性
• 1.2.2 α-淀粉酶抑制剂的分子机制
• 1.3 α-淀粉酶抑制剂的应用
• 1.4 α-淀粉酶抑制剂的减肥作用机制
• 1.4.1 肥胖症和减肥问题
• 1.4.2 减肥药物的研究进展
• 1.4.3 α-淀粉酶抑制剂的减肥作用机制
• 1.5 糖尿病
• 1.6 本研究的目的和意义及研究思路和内容
• 1.6.1 研究的目的和意义
• 1.6.2 研究的思路
• 1.6.3 研究的内容
• 第二章 α-淀粉酶抑制剂的分析方法研究
• 2.1 实验仪器及试剂
• 2.2 α-淀粉酶抑制剂的活性测定方法——DNS比色法
• 2.3 蛋白质含量测定方法
• 2.4 多糖含量测定方法
• 2.5 小结
• 第三章 白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的分离纯化工艺研究
• 3.1 实验仪器、试剂
• 3.2 实验方法和结果
• 3.2.1 白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的提取工艺研究
• 3.2.2 白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的分离纯化研究
• 3.3 小结
• 第四章 白芸豆中α-淀粉酶抑制剂的性质研究
• 4.1 实验仪器、试剂
• 4.2 实验方法
• 4.2.1 纯度鉴定
• 4.2.2 白芸豆α-淀粉酶抑制剂的蛋白质和多糖的含量测定
• 4.2.3 白芸豆α-淀粉酶抑制剂的理化性质研究
• 4.3 小结
• 第五章 白芸豆豆渣的综合利用——豆渣中膳食纤维的研究
• 5.1 膳食纤维简述
• 5.1.1 膳食纤维的定义与分类
• 5.1.2 膳食纤维的理化特性
• 5.1.3 膳食纤维的功效
• 5.2 实验仪器、试剂
• 5.3 实验方法
• 5.3.1 提取工艺研究
• 5.3.2 测定方法
• 5.4 白芸豆及其豆渣的综合利用
• 5.5 小结
• 结论与展望
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间取得的学术成果
• 致谢