论文摘要
宫颈癌是最常见的女性肿瘤之一,其发生与人乳头瘤病毒（human papilloma virus, HPV）,尤其是HPV16,18 感染密切相关。目前基于HPV16 的治疗性疫苗针对的靶蛋白主要为早期蛋白E6 或E7,这些疫苗有一定的疗效。但最近的研究也发现:机体对高危型HPV 病毒（HPV16、HPV18）E6、E7 蛋白的免疫反应与病变的自行消退没有必然联系,这或许是因为E6、E7 的高表达是在晚期病变组织中,而在感染初期和宫颈上皮瘤发生的早期,它们的表达被E2 蛋白抑制了。相反,E2 蛋白作为病毒DNA 复制和基因表达的主要调控蛋白,在感染初期和宫颈上皮瘤早期呈稳定稳定,且丰度较高。由此可以设想:若以HPV16 E2 蛋白为靶点,或许能够在HPV16 所致疾病的早期及时阻断病变的进一步发展。基于以上假设,我们设计了本研究课题。细胞毒性T 细胞（cytotoxic T lymphocyte ,CTL）在机体抗肿瘤和抗病毒的免疫过程中担负重要角色,在抗原刺激和相应的细胞因子诱导下,能够迅速增殖、分化,执行特异性杀伤功能,是设计治疗性疫苗的理论基础。设计HPV16 E2 相关疫苗,诱导针对该蛋白的特异性CTL 活化,阻断HPV16 所致病变,将成为新的治疗方法。完整的HPV16 E2 蛋白除包含CTL 表位外,还包含了B 细胞表位、Th 细胞表位等多种表位,若以完整蛋白做为治疗性疫苗,一方面使表位的针对性不强,另一方面, “免疫偏离”（immune deviation）、“免疫反转”（immune subvertion）等现象均提示:这些表位间可能相互抑制,导致抗原性消减。所以,仅以E2 蛋白CTL 表位为基础,设计制备的治疗性疫苗效果可能会更好。基于此思想,本文从HPV16 E2 蛋白的CTL 表位设计出发,体外诱导特异性CTL,同时构建表达E2 蛋白的靶细胞模型,最后评估该特异性CTL 对靶细胞的杀伤效应。本研究主要由三部分组成: 第一部分HPV16 之E2 蛋白CTL 表位的分析、多肽合成与鉴定基于量化基序法确定E2 蛋白的CTL 表位,选取结合系数最高的2 条九肽和1 条十肽作为候选表位。三条多肽由上海吉尔生化有限公司采用Fmoc 固相合成法合成,多肽合成的收集峰图和分子量质谱分析均提示多肽纯度高、质量好。第二部分质粒pIRES2-HPV16 E2-EGFP 的构建、鉴定及其在Caski 细胞中的表达即表达E2 蛋白的靶细胞模型的构建:以含有人HPV16 全基因组的质粒
论文目录
相关论文文献
- [1].分枝杆菌Rv2450c T细胞表位预测及分析[J]. 武汉轻工大学学报 2019(01)
- [2].线性B细胞表位预测方法研究进展[J]. 中国免疫学杂志 2017(09)
- [3].基于深度最大输出网络的抗体种型特异性B细胞表位预测（英文）[J]. 激光生物学报 2016(01)
- [4].人偏肺病毒多表位抗原的构建与表达[J]. 环境与健康杂志 2015(11)
- [5].线性B细胞表位预测的生物信息学资源和工具的研究进展[J]. 中国生物制品学杂志 2016(06)
- [6].基于支持向量机构象性B细胞表位预测研究[J]. 吉林大学学报(信息科学版) 2015(03)
- [7].线性B细胞表位预测应用研究[J]. 计算机光盘软件与应用 2013(24)
- [8].肝癌高表达抗原MAGEC2 CTL表位肽的鉴定[J]. 中国病理生理杂志 2018(04)
- [9].B细胞表位作图研究进展[J]. 微生物学通报 2017(09)
- [10].风疹病毒复合多表位肽的构建、表达、纯化及其诊断效能的初步评价[J]. 临床检验杂志 2015(12)
- [11].结核分枝杆菌抗原B细胞表位肽对人外周γδT细胞的特异性激活作用[J]. 中国免疫学杂志 2015(07)
- [12].展示日本乙型脑炎病毒B细胞表位和T细胞表位的猪细小病毒病毒样颗粒的制备[J]. 中国兽医科学 2013(04)
- [13].表位疫苗研究进展[J]. 动物医学进展 2012(01)
- [14].抗原优势表位的筛选方法[J]. 中国病原生物学杂志 2012(01)
- [15].一种蛋白质B细胞表位展示系统的构建及验证[J]. 中国生物工程杂志 2012(06)
- [16].人类表皮生长因子受体2的B细胞表位初步预测分析[J]. 中国全科医学 2010(05)
- [17].血管内皮细胞生长因子表位肽体外抗肿瘤作用研究[J]. 中国免疫学杂志 2010(05)
- [18].B细胞表位的计算机预测[J]. 生命的化学 2008(06)
- [19].细胞毒性T淋巴细胞表位预测[J]. 生命的化学 2008(03)
- [20].胰腺癌高表达抗原MUC4 CTL表位肽的体内免疫原性[J]. 中国病理生理杂志 2018(03)
- [21].鸡蛋过敏原表位研究进展[J]. 食品工业科技 2016(03)
- [22].Ⅰ型登革热病毒细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定[J]. 微生物学免疫学进展 2016(03)
- [23].食物过敏原构象性表位预测技术研究进展[J]. 食品科学 2013(13)
- [24].金黄色葡萄球菌肠毒素A蛋白的B细胞表位的预测[J]. 中国微生态学杂志 2012(01)
- [25].靶向人端粒酶逆转录酶T细胞表位肽的治疗性癌症疫苗研究进展[J]. 医学研究生学报 2009(11)
- [26].基孔肯雅病毒中和表位的筛选及表达[J]. 军事医学科学院院刊 2008(05)
- [27].胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3限制性表位肽诱导的细胞毒性T淋巴细胞的体外免疫应答[J]. 解剖学报 2020(04)
- [28].传染性支气管炎病毒中和表位研究进展[J]. 中国生物制品学杂志 2019(02)
- [29].口蹄疫表位疫苗的研究进展[J]. 中国兽医科学 2019(04)
- [30].从专利分析角度看口蹄疫表位疫苗[J]. 山东化工 2019(18)