百合离体条件下的耐盐性评价和EMS诱变育种初步研究

论文摘要

百合为多年生球根花卉,是世界上重要的鲜切花之一,具有较高的观赏价值和经济价值。从目前百合育种情况来看,大部分工作的目标是提高观赏性状,而有关抗性育种方面工作很少见报道。本研究从离体条件下百合的耐盐性评价和EMS诱变育种两个方面对百合耐盐研究进行了初步探索,结果如下：1.对百合六个栽培品种和两个野生种组培快繁,得到大量组培苗。通过用添加不同浓度NaCl的培养基对这些组培苗进行筛选,根据盐胁迫下百合的生长表现,判断其耐盐阈值,结果得到：‘耀眼黄’为14g/L,‘伯尼尼’为13g/L,‘真情’和‘元帅’为12g/L,‘辛普隆’、云南野生百合、麝香百合和‘西伯利亚’为10g/L。2.在同一盐浓度下对百合不同品种或种的组培苗进行胁迫,随机抽样,测定生理生化指标,通过MDA含量,SOD、POD、CAT活性的变化来评价百合的耐盐性强弱。根据综合评价,按耐盐性强弱排序为：‘耀眼黄’>‘伯尼尼’>‘真情’>‘元帅’>‘辛普隆’>云南野生百合>麝香百合>‘西伯利亚’。3.将麝香百合愈伤组织接种到含不同浓度NaCl的培养基中,定期统计成活率,判断愈伤组织的耐盐阈值为10g/L。4.设置不同浓度的EMS溶液对愈伤组织进行不同时间的处理,结果发现处理时间相同时,低浓度EMS溶液可以提高愈伤组织成活率,高浓度抑制愈伤组织生长。EMS浓度相同时,随着处理时间的延长,愈伤组织的成活率下降。同时,确定了0.6%+2h为EMS对麝香百合愈伤组织的最佳诱变剂量。5.由EMS诱变后的愈伤组织分化成的植株经耐盐筛选,得到耐盐性增强的变异植株。对这些变异株测定生理生化指标,结果表明MDA含量一直低于对照,SOD活性、POD活性都一直高于对照,CAT活性在盐胁迫9d后也高于对照。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.文献综述
• 1.1 百合种质资源
• 1.2 百合组织培养
• 1.3 百合生态习性
• 1.4 植物耐盐机制
• 1.5 盐胁迫对植物生长和发育的影响
• 1.6 盐胁迫下植物生理生化变化
• 1.6.1 膜透性的改变
• 1.6.2 光合特性的变化
• 1.6.3 有机渗透调节物质的变化
• 1.6.4 酶保护系统的变化
• 1.6.5 离子分布的变化
• 1.7 耐盐突变体的选育
• 1.7.1 辐射诱变育种
• 1.7.2 化学诱变育种
• 1.7.3 耐盐材料的选择
• 1.7.4 耐盐突变体的筛选
• 1.7.5 耐盐突变体的鉴定
• 2.研究目的和意义
• 第二章 百合离体条件下的耐盐性评价
• 1.材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验条件
• 1.3 主要药品和仪器
• 1.3.1 主要药品
• 1.3.2 仪器设备
• 1.4 试验培养基
• 1.5 试验方法
• 1.5.1 小鳞片的再生增殖
• 1.5.2 耐盐阈值的测定方法
• 1.5.3 组培苗受盐害级别
• 1.5.4 丙二醛的测定方法
• 1.5.5 粗酶液提取的方法
• 1.5.6 超氧化物歧化酶活性的测定方法
• 1.5.7 过氧化物酶的测定方法
• 1.5.8 过氧化氢酶的测定方法
• 1.5.9 耐盐性综合评价
• 1.5.10 数据处理方法
• 2 结果与分析
• 2.1 小鳞片再生率和增殖系数比较
• 2.2 盐胁迫对组培苗生长状况的影响
• 2.2.1 同一盐浓度对不同百合生长状况的影响
• 2.2.2 ‘耀眼黄’在不同盐浓度下的生长表现
• 2.2.3 ‘元帅’在不同盐浓度下的生长表现
• 2.2.4 ‘真情’在不同盐浓度下的生长表现
• 2.2.5 ‘伯尼尼’在不同盐浓度下的生长表现
• 2.2.6 ‘辛普隆’在不同盐浓度下的生长表现
• 2.2.7 耐盐阈值的比较
• 2.3 生理生化指标的测定结果
• 2.3.1 盐胁迫下不同百合MDA含量的变化
• 2.3.2 盐胁迫下不同百合SOD活性的变化
• 2.3.3 盐胁迫下不同百合POD活性的变化
• 2.3.4 盐胁迫下不同百合CAT活性的变化
• 2.4 不同品种或种之间的聚类分析
• 2.5 耐盐性综合评价
• 3. 讨论
• 3.1 耐盐阈值的确定
• 3.2 耐盐性评价标准的选择
• 3.3 生理生化指标的选择
• 第三章 EMS诱变育种
• 1 材料与方法
• 1.1 试验材料
• 1.2 试验药剂
• 1.3 试验培养基
• 1.4 试验方法
• 1.4.1 EMS溶液的配制
• 1.4.2 愈伤组织耐盐能力的测定方法
• 1.4.3 EMS溶液对愈伤组织最佳诱变剂量的测定
• 1.4.4 EMS和NaCl共同作用对愈伤组织的影响
• 1.4.5 耐盐变异体的筛选
• 1.4.6 耐盐变异体的生理指标测定
• 2.结果与分析
• 2.1 愈伤组织耐盐选择压的确定
• 2.2 直接用磷酸缓冲液配制EMS对愈伤组织成活率的影响
• 2.3 加液体培养基配制EMS对愈伤组织的影响
• 2.4 EMS和NaCl溶液共同对愈伤组织的影响
• 2.5 耐盐变异体的筛选
• 2.6 诱变植株在盐胁迫下MDA含量的变化
• 2.7 诱变植株在盐胁迫下SOD活性的变化
• 2.8 诱变植株在盐胁迫下POD活性的变化
• 2.9 诱变植株在盐胁迫下CAT活性的变化
• 3.讨论
• 3.1 EMS溶液的配制
• 3.2 EMS最佳剂量的选择
• 3.3 嵌合体的消除
• 3.4 突变体筛选和鉴定方法的选择
• 总结
• 参考文献
• 致谢