卵转铁蛋白免疫调节作用的研究

论文摘要

卵转铁蛋白是一种铁结合糖蛋白,主要来源于鸟类卵清及血清,具有免疫调节、参与铁的运输与代谢、抗菌、抗病毒和抗氧化等生物功能。卵转铁蛋白可作为功能因子添加到保健食品中或者作为药品组分,具有广阔的开发与应用前景。本试验通过体外细胞培养及动物试验,研究卵转铁蛋白的免疫调节作用。主要研究内容和结果如下：1、采用中性红吞噬法、MTT法、双抗体夹心ELISA法,研究卵转铁蛋白对免疫细胞功能的影响。结果表明：OVT能显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对中性红吞噬能力（P<0.01）,协同LPS促进腹腔巨噬细胞的增殖（P<0.05）,并显著改善由CsA引起的对小鼠腹腔巨噬细胞增殖活性的抑制作用（P<0.05）；OVT能显著促进脾淋巴细胞的增殖（P<0.01）,协同LPS和ConA促进小鼠脾淋巴细胞的增值（P<0.05）,并能显著促进小鼠正常脾淋巴细胞IL-2的分泌（P<0.01）。说明在体外培养的条件下,卵转铁蛋白对正常小鼠免疫细胞的免疫能力有促进作用。2、按照免疫调节功能性食品的评价指标,对卵转铁蛋白的免疫调节作用进行了评价。结果表明：卵转铁蛋白显著提高环磷酰胺所致免疫低下小鼠的脾脏指数、胸腺指数、耳肿胀度以及抗体积数,并呈现一定的剂量依赖关系；其中,高剂量的卵转铁蛋白对上述各指标都有显著性影响,与模型对照组比较p<0.01。试验各项指标的检测结果均呈阳性,可判定卵转铁蛋白具有增强机体免疫调节的作用。3、以环磷酞胺所致免疫低下小鼠作为试验动物模型,研究卵转铁蛋白对环磷酰胺模型小鼠外周血Th1、Th2型细胞因子（IFN-γ、IL-4）（?）平及I FN-γ/I L-4比值的影响。结果表明：模型对照组小鼠血.清IFN-γ的浓度和IFN-γ/IL-4比值与正常对照组相比明显降低p<0.01；高剂量组小鼠血清IFN-γ的浓度和IFN-γ/IL-4比值显著高于模型对照组p<0.01,与正常组比较,无显著性差异。说明OVT能纠正由环磷酰胺所致免疫低下小鼠Th1/Th2的失衡,增强免疫低下小鼠的免疫功能。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 缩略词
• 第一章 文献综述
• 1 卵转铁蛋白的结构与理化性质
• 1.1 卵转铁蛋白的组成结构与性质
• 1.2 卵转铁蛋白结合和释放铁的机理
• 2 卵转铁蛋白的生物功能
• 2.1 参与铁的运输与代谢功能
• 2.2 抗菌功能
• 2.3 抗病毒功能
• 2.4 抗氧化功能
• 2.5 增强机体的免疫力
• 2.6 其他功能
• 3 转铁蛋白免疫调节作用国内外研究概况
• 4 免疫系统
• 4.1 什么是免疫系统
• 4.2 天然免疫
• 4.3 获得性免疫
• 4.4 细胞因子
• 5 本课题的立题背景、研究意义和主要研究内容
• 5.1 立题背景和研究意义
• 5.2 主要研究内容
• 5.2.1 卵转铁蛋白体外免疫活性研究
• 5.2.2 卵传铁蛋白的免疫调节作用评价
• 5.2.3 卵转铁蛋白对免疫低下小鼠TH1/TH2细胞平衡的影响
• 5.3 本论文的特点和创新之处
• 第二章 卵转铁蛋白体外免疫活性研究
• 1 试验材料与仪器
• 1.1 主要实验材料
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 试剂配制
• 2 实验方法
• 2.1 卵转铁蛋白对腹腔巨噬细胞功能的影响
• 2.1.1 小鼠腹腔巨噬细胞的制备
• 2.1.2 卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
• 2.1.3 卵转铁蛋白对小鼠腹腔巨噬细胞增殖作用的影响
• 2.2 卵转铁蛋白对脾淋巴细胞功能的影响
• 2.2.1 小鼠脾淋巴细胞细胞的制备
• 2.2.2 卵转铁蛋白对小鼠脾淋巴细胞细胞增殖作用的影响
• 2.2.3 卵传铁蛋白对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的影响
• 2.2.4 定量ELISA检测IL-2
• 2.3 统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 OVT对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响
• 3.2 OVT单独对小鼠腹腔巨噬细胞增殖作用的影响
• 3.3 OVT对LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞增殖作用的影响
• 3.4 OVT对CSA刺激小鼠腹腔巨噬细胞增殖作用的影响
• 3.5 OVT单独对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响
• 3.6 OVT对LPS刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响
• 3.7 OVT对CONA刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响
• 3.8 OVT对CSA刺激小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响
• 3.9 OVT对小鼠脾淋巴细胞分泌IL-2的影响
• 4 讨论
• 5 小结
• 第三章 卵转铁蛋白的免疫调节作用评价
• 1 试验材料与仪器
• 1.1 主要实验材料
• 1.2 主要仪器设备
• 1.3 主要试剂配制
• 2 试验方法
• 2.1 卵传铁蛋白对免疫器官的影响
• 2.1.1 建立小鼠免疫低下模型
• 2.1.2 实验动物分组及指标测定
• 2.2 卵转铁蛋白对细胞免疫的影响——二硝基氟苯诱导迟发型变态反应（DTH）
• 2.2.1 建立小鼠细胞免疫低下模型
• 2.2.2 实验动物分组及指标测定
• 2.3 卵转铁蛋白对体液免疫的影响——血清溶血素的测定
• 2.3.1 建立小鼠体液免疫低下模型
• 2.3.2 实验动物分组及指标测定
• 2.3.3 数据处理及结果判定
• 2.4 统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 卵传铁蛋白对免疫器官的影响
• 3.1.1 免疫低下模型的建立
• 3.1.2 OVT对免疫器官的影响
• 3.2 卵转铁蛋白对细胞免疫的影响——二硝基氟苯诱导迟发型变态反应（DTH）
• 3.2.1 小鼠细胞免疫低下模型的建立
• 3.2.2 OVT对免疫低下小鼠DTH的影响
• 3.3 卵转铁蛋白对体液免疫的影响——血清溶血素的测定
• 3.3.1 小鼠体液免疫低下模型的建立
• 3.3.2 小鼠体液免疫低下模型的建立
• 4 讨论
• 5 小结
• 第四章 卵转铁蛋白对免疫低下小鼠TH1/TH2细胞平衡的影响
• 1 试验材料与仪器
• 1.1 主要实验材料
• 1.2 主要仪器设备
• 2 试验方法
• 2.1 建立小鼠免疫低下模型
• 2.2 实验动物分组灌胃与处理
• 2.3 血清中IFN-Γ含量的测定
• 2.4 血清中IL-4含量的测定
• 2.5 统计分析
• 3 结果与分析
• 3.1 OVT对小鼠血清IFN-Г的影响
• 3.2 OVT对小鼠血清IL-4的影响
• 3.3 OVT对小鼠血清IFN-Г/IL-4的影响
• 4 讨论
• 5 小结
• 结论与展望
• 1 结论
• 2 展望
• 参考文献
• 致谢
• 在校期间学习成果