论文摘要
弓形虫是一种分布广泛的、专性细胞内寄生机会致病原虫,可感染人及多种动物的有核细胞。弓形虫感染人体后可侵犯多种脏器和组织并可通过母婴垂直传播而造成胎儿畸形、神经系统发育障碍、脉络膜视网膜炎等引起流产、早产甚至死胎。对免疫功能低下者如艾滋病患者是致死主要病因。此外,弓形虫病也给畜牧业生产造成严重的经济损失。因此,为了有效的防治弓形虫,疫苗的研制已成为预防及治疗弓形虫病的发展方向。在研究有关弓形虫疫苗的过程中,发展多种抗原组合、针对不同生活史发育阶段的复合多价疫苗是研究弓形虫疫苗过程中的一个发展方向与共识,这有助于克服单一抗原成分作为候选疫苗的不足。SAG1抗原作为弓形虫速殖子期特异的主要表面抗原之一,具有高度的免疫原性和免疫保护性,是弓形虫感染免疫诊断和疫苗开发的的主要候选抗原。ROP2蛋白是弓形虫棒状体分泌的一种蛋白,主要协助虫体入侵宿主细胞,在弓形虫生活史的速殖子期、缓殖子期和子孢子期中均有表达,具有高度的保守性和免疫原性。SAG2抗原为速殖子膜表面的另一重要抗原,与弓形虫入侵宿主细胞有密切的关系,到目前为止,对弓形虫SAG2蛋白的功能研究较少,SAG2蛋白可以使弓形虫固定于有核细胞的表面,并辅助弓形虫进入有核细胞,介导弓形虫速殖子的入侵过程。同时,为攻克核酸疫苗免疫效力低下的难题,我们选用小鼠白介素12（mIL-12）的真核表达质粒作为基因佐剂,以增强弓形虫复合抗原基因SAG1-ROP2-SAG2的免疫效果。在弓形虫感染早期IL-12可强烈刺激NK细胞和T细胞分泌IFN-γ,继之激活巨噬细胞提高其杀伤弓形虫活力,也能促进CD4+T细胞向Th1细胞分化,并增强NK细胞和CD8+T细胞杀伤功能。同时,IL-12对促进IFN-γ的持续产生也起到重要作用。因此IL-12的表达在弓形虫感染的急慢性期均起到重要作用。本研究选用弓形虫复合抗原基因SAG1-ROP2-SAG2及基因佐剂mIL-12通过肌注方式免疫小鼠,观察并研究其免疫保护性。结果表明复合基因疫苗的免疫效果明显优于单基因疫苗SAG2及双基因疫苗SAG1-ROP2,并且IL-12可以对该复合基因疫苗起到很好的免疫增强作用。在弓形虫研究领域,国内外尚无此项研究报道。