论文摘要
[目的]miRNA是近些年来新发现的一类能够通过与其靶位点结合调控靶基因表达水平的小RNA分子家族,在生物体内发挥着重要作用。研究表明,一些miRNA与人类肿瘤密切相关,直接或间接调控肿瘤的增殖和转移过程。本文旨在研究miRNA在肿瘤增殖与转移中的调控作用及其可能的机制。[方法]1采用MTT法和平板克隆形成实验研究miRNA在肿瘤的增殖过程中的调节作用。2通过transwell侵袭实验研究miRNA在恶性肿瘤细胞转移过程的作用。3利用表达谱芯片和生物信息学方法筛选候选miRNA靶基因,并进行荧光报告载体的验证,并采用RT-PCR方法验证miRNA对其靶基因的作用。[结果]1 MTT法检测发现,miR-20a对ES-2细胞短期内的生长没有显著影响；平板克隆形成实验表明miR-20a对ES-2细胞的增殖具有明显的促进作用。2通过transwell侵袭实验结果分析,发现miR-20a对ES-2细胞的侵袭及转移功能具有正向调节作用。3利用表达谱芯片结合生物信息学的方法,筛选到miR-20a的两个候选靶基因APP和CCND1。利用荧光报告载体的方法验证了miR-20a与候选靶基因的直接作用关系,并采用RT-PCR方法再次进行验证。[结论]本文以miR-20a为代表研究了miRNA在肿瘤的增殖及侵袭过程中的调控作用,筛选并验证了miR-20a直接作用的靶基因APP和CCND1.同时对miR-20a在肿瘤增殖及侵袭过程中的调控功能和调控机制进行探索和研究,使我们对于肿瘤的增殖和转移特性及调控机制有了进一步的理解,并为临床上恶性肿瘤的防治提供了一条新的可能途径。
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