论文摘要
嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila HB310（Xn HB310）是本实验室筛选得到的一株具有高毒力的昆虫病原线虫共生菌。该菌能够分泌多种杀虫毒素蛋白,具有广谱的杀虫活性,同时对不同昆虫的毒力差别又很大。为了明确影响其杀虫活性的主要因子及其杀虫机理,更好的应用这一微生物资源,本研究分析比较了对病原线虫共生菌不同敏感程度的昆虫的中肠组织及环境的差异性,另外,对其水悬浮剂的配方进行研究,并通过与七种常用杀虫剂的混配筛选出具有增效作用的杀虫剂。现将主要研究结果总结如下。1.对不同敏感性昆虫中肠环境的差异性进行分析,结果显示在较大的pH值范围内（410）,Xn HB310均能保持较高的杀虫活性。分别用不敏感、敏感和次敏感的昆虫的中肠酶液酶解杀虫毒素粗提物,然后测定其对小菜蛾幼虫的杀虫活性,结果表明经不同昆虫中肠酶液酶解的毒素粗提物的杀虫活性没有明显的差异。杀虫活性的大小与中肠围食膜的薄厚和韧性有关,敏感昆虫的围食膜较薄、韧性差。此外,当以围食膜较厚的棉铃虫为检测对象时,对围食膜有破坏作用的荧光增白剂FB-28对Xn HB310有一定的增效作用,能显著提高Xn HB310对棉铃虫3龄幼虫的体重抑制率。2.以滴喂和浸叶饲喂东亚飞蝗Xn HB310菌液后,各时间段内均未在其血腔内发现共生菌的存在,这说明在整个杀虫过程中起到关键性作用的因子是Xn HB310毒素蛋白而非活细胞。3.对各种助剂进行筛选,最终获得40%共生菌水悬浮剂最佳配方为:Xn HB310细胞沉淀40%、OP-10 4%、乳化剂600# 2%、黄原胶0.1%、山梨酸钾0.1%、尼泊金甲酯0.03%、脱氢乙酸钠0.2%、乙二醇5%、有机硅0.6%、全脂奶粉2%和水45.97%。盆栽试验表明该制剂对小菜蛾有良好的防治效果,50倍、100倍和200倍稀释液对3龄小菜蛾72h的防治效果为分别为97.56%、90.24%和80.49%,均高于50倍的细胞悬浮液的防治效果（75.61%）。4.采用浸叶法测定了Xn HB310与七种常用杀虫剂混配后对小菜蛾3龄幼虫的毒杀增效作用,并对具有增效作用的混配组合进行了最佳配比的筛选和增效作用的评价。结果显示Xn HB310仅与氯氰菊酯混配表现出明显的增效作用,协同毒力指数（cf）为30.9;当Xn HB310与氯氰菊酯质量比在1006.4:2.6816:4之间时,混配药剂均表现为增效作用;当两种药剂的质量比为952:3时,增效作用最强,此时的共毒系数最高为335。Xn HB310与乐斯本、吡虫啉或甲胺基阿维菌素苯甲酸盐混配均表现为相加作用,cf值分别为9.6、-6.9和-18.6,Xn HB310与菜喜、灭幼脲或阿维菌素混配则表现出明显的拮抗作用,cf值分别为-48.4、-24.9和-57.1。