论文摘要
目的:探讨雷公藤多苷（Tripterygium Wilfordii Polyglycosidium,TWP）对特应性皮炎（Atopic Dermatitis,AD）患者IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-α细胞因子表达的影响,从而了解雷公藤多苷对AD免疫影响的分子机制,进一步阐明AD发病的分子机制,为临床科学合理地应用雷公藤多苷治疗AD提供一定的理论依据。方法:本研究采用不同浓度的雷公藤多苷制剂,对AD患者外周血体外培养的单个核细胞（peripheral blood monouclear cells,PBMC）进行处理,然后用RT-PCR方法测定不同处理组细胞IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-αm RNA的表达。1采用Ficoll密度梯度离心法分离AD患者的外周血PBMC,采用不同浓度（0mg/L,0.5 mg/L,1mg/L,5mg/L）的雷公藤多苷进行处理后培养48小时。2采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测雷公藤多苷对体外培养的AD患者PBMC处理后,PBMC IL-2、IL-4、IFN-γ和TNF-αm RNA表达的变化。结果:1、对IL-2表达的影响:雷公藤多苷对AD患者体外培养PBMC IL-2 mRNA表达的影响,除了高浓度组与低浓度组和对照组、中浓度组与对照组IL-2 m RNA表达水平之间差别有统计学意义之外（P<0.01或P<0.05）;其余组间比较,差别无统计学意义（P>0.05）。2、对IL-4表达的影响:雷公藤多苷对AD患者体外培养PBMC IL-4 mRNA表达的影响,除了高浓度组与中浓度组比较无统计学意义（P>0.05）外,其余各组之间的差别均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。AD组与健康对照组体外培养PBMC IL-4 m RNA的表达比较有统计学意义（P<0.01）,AD组IL-4的基因表达水平高于健康对照组。3、对IFN-γ表达的影响:雷公藤多苷对AD患者体外培养PBMC的表达IFN-γm RNA影响,除了高浓度组与中浓度组、中浓度组与低浓度组、低浓度组与对照组之间IFN-γm RNA表达水平差别无统计学意义之外（P>0.05）,AD患者其余各组之间差别均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。AD组体外培养PBMC IFN-γm RNA表达低于健康对照组。4、对TNF-α表达的影响:雷公藤多苷对AD患者体外培养PBMC TNF-α表达的影响,除了高浓度组与中浓度组、中浓度组与低浓度组之间TNF-αm RNA表达水平差别没有统计学意义之外（P>0.05）,AD患者其余各组之间差别均有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。AD组体外培养PBMC TNF-αm RNA表达低于健康对照组。结论:1、本实验证实AD患者IFN-γ的基因表达水平低于健康对照组,AD组IL-4的基因表达水平高于健康对照组,证实AD患者存在Th1/Th2失衡。雷公藤多苷通过对二者不同程度的抑制,可以使Th1/Th2失衡得到改善。2、中浓度和高浓度雷公藤对体外培养IL-2基因表达具有明显抑制作用。雷公藤通过抑制IL-2的表达来抑制T、B细胞的增殖,从而影响多种细胞因子的表达,发挥雷公藤免疫调节作用。3、AD患者体外培养PBMC TNF-α基因表达水平低于健康对照组。4、中浓度和高浓度（即1.0mg/L5.0mg/L）雷公藤多苷对体外培养PBMC具有很好的免疫抑制作用。