大蒜生理活性物质的提取及其抗菌和抗黑色素瘤细胞作用的研究

论文摘要

我国是大蒜的主要生产国和出口国,大蒜品种多样,质地优良。但近几年西方国家对我国出口大蒜实施反倾销和配额限制,加之我国大蒜加工技术的落后,造成了农业损失。为了缓解这一农业生产上的问题,需要研究技术含量高、收效好的大蒜深加工技术。建立了从新鲜大蒜中提取分离蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜素的方法,蒜氨酸经高效液相检测,与标准蒜氨酸相比,纯度达98%,蒜氨酸酶活力单位为2472U/mg,每100克蒜素粗提物含17.02克蒜素。通过测定蒜氨酸酶、蒜氨酸+蒜氨酸酶、蒜素和蒜汁对十种致病细菌的抑菌作用,结果发现它们对十种致病细菌均有较明显的抑菌作用。首次发现蒜氨酸+蒜氨酸酶对供试菌的抑菌作用较强,且MIC低于蒜素。比较了蒜氨酸、蒜氨酸酶、蒜氨酸+蒜氨酸酶、蒜素和蒜汁对五种植物病原真菌（交格链孢菌、指状青霉、灰霉、稻瘟病菌和意大利青霉）的抑菌效果,结果发现蒜氨酸酶、蒜氨酸+蒜氨酸酶、蒜素和蒜汁对五种植物病原真菌都有明显的抑菌作用;通过MIC、菌丝抑制率和孢子萌发率的比较发现,抑菌效果由强至弱依次为:蒜氨酸+蒜氨酸酶>蒜素>蒜汁>蒜氨酸酶。蒜氨酸酶、蒜氨酸+蒜氨酸酶、蒜素和蒜汁对五种植物病原真菌的抑菌作用明显比十种致病细菌的抑菌作用强。研究了蒜素和蒜氨酸+蒜氨酸酶对黑色素瘤细胞体外增殖及细胞周期的影响,采用结晶紫法检测了细胞体外增殖率,结果表明蒜氨酸+蒜氨酸酶对黑色素瘤细胞体外增殖的抑制率比蒜素高,抑制率达到92%。用流式细胞仪检测发现它们阻滞黑色素瘤细胞周期于G0/G1期。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一部分 文献综述
• 1. 大蒜的概述
• 1.1 大蒜植物学特征
• 1.2 大蒜资源分布
• 2 大蒜主要化学成分
• 2.1 含硫有机化合物
• 2.2 糖类
• 2.3 蛋白质
• 2.4 酶类
• 2.5 维生素与微量元素
• 2.6 大蒜中的代谢反应
• 3 大蒜生物活性物质的分离提取
• 3.1 蒜素的提取
• 3.2 蒜氨酸的提取
• 3.3 大蒜活性成分的检测
• 4 大蒜的药理作用
• 4.1 抗微生物作用
• 4.2 抗肿瘤作用
• 5 本研究的目的及意义
• 第二部分 实验
• 第一章 新鲜大蒜中蒜氨酸、蒜氨酸酶和蒜素的分离提取
• 1 蒜氨酸的提取
• 1.1 材料与方法
• 1.2 结果与分析
• 2 蒜氨酸酶的提取与酶活性测定
• 2.1 材料、仪器及设备
• 2.2 蒜氨酸酶的提取
• 2.3 蒜氨酸酶活力的测定
• 2.4 结果与分析
• 3 蒜素的提取与检测
• 3.1 材料、仪器及设备
• 3.2 蒜素的提取
• 3.3 蒜素含量的检测
• 3.4 结果与分析
• 第二章：大蒜中生理活性物质的体外抑菌作用
• 1 大蒜中生理活性物质对致病细菌的体外抑制作用
• 1.1 材料
• 1.2 方法
• 1.3 结果与分析
• 1.4 讨论
• 2 大蒜生理活性物质对几种植物病原真菌的体外抑菌活性
• 2.1 材料
• 2.2 方法
• 2.3 结果与分析
• 2.4 讨论
• 第三章 蒜素和蒜氨酸+ 蒜氨酸酶对黑色素瘤细胞的抑制作用
• 1 材料
• 2 方法
• 2.1 细胞培养
• 2.2 蒜素和蒜氨酸＋蒜氨酸酶对黑色素瘤细胞的体外细胞增殖抑制试验
• 2.3 细胞周期分析
• 3 结果
• 3.1 细胞形态变化
• 3.2 蒜素和蒜氨酸＋蒜氨酸酶作用于B16 增殖抑制率测定
• 3.3 蒜素和蒜氨酸＋蒜氨酸酶对B16 细胞周期的影响
• 4 讨论
• 第三部分 结论
• 结论一
• 结论二
• 结论三
• 参考文献
• 在读期间发表论文
• 致谢