山羊胎盘复方制剂的制备及功效研究

论文摘要

以山羊胎盘为原料,用现代工艺进行提取,并将提取物（GPE）与其他辅助原料按照不同的配方分别制备成羊胎盘复方制剂Ⅰ号（GPPⅠ）和羊胎盘复方制剂Ⅱ号（GPPⅡ）,在两种复方制剂中,每500mg制成品的羊胎盘含量相当于鲜胎盘30g。以小鼠为实验动物,对山羊胎盘提取物及两种不同配方的复方制剂进行毒理学检测（包括急性毒性实验、30天喂养实验、鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验、睾丸染色体畸变实验、骨髓细胞微核实验）、免疫功能测定（包括ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验和小鼠NK细胞活性检测实验）和缺氧耐受力实验（包括常压缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验和急性脑缺血性缺氧实验）。实验中,GPE、GPPⅠ和GPPⅡ在每个实验中各设一个单倍剂量组,以便在先前研究的基础上再进一步确认GPPⅡ的配方优势,并且再在每个实验中根据相关检测要求,对GPPⅡ设计低、中、高三个剂量组和对照组,每组小鼠数量为5～20只（按实验的具体要求而定）,各实验组小鼠均采取人工灌胃方法投喂产品。研究结果如下:1、在急性毒性实验中,各剂量组小鼠采食及排便正常,精神状态良好,均未出现异常表现及死亡现象,。2、在30天喂养实验中,各剂量组小鼠精神状况良好,生理行为正常,未出现中毒迹象和死亡;在食物利用率、各项血液学和血液生化指标均无显著变化（P＞0.05）,各器官组织病理检查未发现病变和细胞组织异样,绝大部分重要脏器的绝对重量与相对重量比差异不显著（P＞0.05）,但GPPⅡ部分剂量组脾脏的绝对重量与相对重量比与对照组相比有显著差异（P＜0.05）。3、在鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验（Ames实验）实验中,GPE、GPPⅠ和GPPⅡ各剂量组的回变菌落数,不论加S-9与否,均未超过相应溶剂对照组值的两倍,同时也未发现剂量—反应关系。故羊胎盘各制剂的Ames实验结果为阴性,表明无致突变作用。4、在小鼠睾丸染色体畸变实验中,GPE、GPPⅠ及GPPⅡ的各剂量组小鼠睾丸染色体的断片数、易位数、染色体（包括常染色体和性染色体）单价数、畸变细胞数及其畸变率与阴性对照组相比差异不显著（P＞0.05）,但与CTX处理的阳性对照组达到极显著差异（P＜0.01）。5、在小鼠骨髓细胞微核实验中,GPE、GPPⅠ及GPPⅡ的各剂量组小鼠骨髓PCE微核率与阴性对照组相比无显著性差异（P＞0.05）。而阳性对照组的小鼠骨髓PCE微核率则显著高于其他实验组（P＜0.01）。6、免疫功能检测中,小鼠脾淋巴细胞转化实验和NK细胞活性实验结果表明,GPPⅠ实验组与GPPⅡ单、中剂量组的小鼠的脾淋巴细胞增值能力显著增强（P＜0.05）,GPPⅡ低、高剂量组小鼠脾淋巴细胞增值能力达到极显著水平（P＜0.01）,GPE则差异未达到显著水平（P＞0.05）。GPPⅡ低、高剂量组小鼠脾淋巴细胞增殖能力也显著高于GPEⅠ号和GPE组（P＜0.05）;GPPⅡ单、低、中剂量组小鼠的NK细胞活性显著增强（P＜0.05）,且低剂量组差异极显著（P＜0.01）,其他实验组差异不显著（P＞0.05）。7、缺氧耐受力实验结果表明,与对照组相比,GPPⅡ单、中、高剂量组小鼠的常压缺氧存活时间显著延长（P＜0.05）,其他实验组虽差异不显著（P＞0.05）,但缺氧存活时间也有所延长;在亚硝酸钠中毒存活实验中,GPE组的小鼠存活时间显著长于其他实验组（P＜0.05）,且与对照组差异达到显著水平（P＜0.01）,GPPⅠ组和GPPⅡ四个实验组小鼠存活时间也比对照组显著延长（P＜0.05）,且实验各组间差异水平显著（P＜0.05）;在急性脑缺血性缺氧实验中,GPPⅡ四个实验组小鼠的脑缺氧存活时间均显著长于对照组和GPPⅠ组（P＜0.01）,且其高剂量组与GPE组相比也达到极显著水平（P＜0.01）,GPPⅡ的另三个剂量组与GPPⅠ组相比差异极显著（P＜0.01）,且各实验组间差异也极显著（P＜0.01）。以上结果可以的看出,GPPⅡ具有增强小鼠机体缺氧耐受力的作用,且增强作用明显优于GPPⅠ和GPE。综合以上研究结果,认为GPE、GPPⅠ和GPPⅡ三种羊胎盘制剂对动物机体均无毒副作用和致突变作用,且具有提高机体免疫力和缺氧耐受力的作用。在本实验设计的配方中,GPPⅡ的效果最佳。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 列表和附图清单
• 英文缩写一览表
• 文献综述
• 引言
• 1 材料与方法
• 1.1 材料
• 1.1.1 实验材料
• 1.1.2 实验动物
• 1.1.3 药品与试剂
• 1.1.4 实验仪器
• 1.1.5 其它材料
• 1.1.6 材料的处理和溶液的配置
• 1.2 胎盘制品的制备
• 1.2.1 胎盘提取液的制备
• 1.2.2 胎盘复方制剂的制备
• 1.3 实验设计
• 1.3.1 毒性实验
• 1.3.2 致突变与致畸实验
• 1.3.3 增强免疫功能实验
• 1.3.4 提高缺氧耐受力功能实验
• 1.4 数据处理
• 2 结果
• 2.1 山羊胎盘制成品观察
• 2.2 羊胎盘复方制剂对小鼠毒性实验结果
• 2.2.1 一次最大耐受量观察实验结果
• 2.2.2 小鼠30天饲喂观察实验结果
• 2.3 致突变和致畸实验结果
• 2.3.1 鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验结果
• 2.3.2 小鼠睾丸染色体畸变实验结果
• 2.3.3 小鼠骨髓细胞微核实验结果
• 2.4 增强免疫功能实验结果
• 2.4.1 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验结果
• 2.4.2 小鼠NK活性细胞测定实验结果
• 2.5 提高缺氧耐受力实验结果
• 2.5.1 小鼠常压缺氧实验结果
• 2.5.2 小鼠亚硝酸钠中毒存活实验结果
• 2.5.3 小鼠急性脑缺血性缺氧实验结果
• 3 讨论
• 3.1 山羊胎盘安全性问题
• 3.1.1 一次最大耐受量实验
• 3.1.2 小鼠30天饲喂实验
• 3.1.3 鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶实验
• 3.1.4 小鼠睾丸染色体畸变实验
• 3.1.5 小鼠骨髓细胞微核实验
• 3.2 小鼠免疫功能测定实验
• 3.2.1 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化
• 3.2.2 小鼠NK活性细胞测定
• 3.3 小鼠缺氧耐受力测定实验
• 3.3.1 小鼠常压缺氧存活实验
• 3.3.2 小鼠亚硝酸钠中毒存活实验
• 3.3.3 小鼠急性脑缺血性缺氧实验
• 4 结论
• 参考文献
• 致谢
• 个人简历