论文摘要
第一部分无血清培养条件下神经干细胞的生长及分化的研究目的:探讨体外无血清条件下培养胚鼠神经干细胞（NSCs）,观察其生长及分化情况.方法:取孕16-18天SD系大鼠的胚胎海马组织,在含EGF,bFGF,B27的DMEM/F12培养基中培养,电子显微镜下观察其增殖分化过程,并通过免疫荧光方法鉴定分化后的细胞类型.结果:NSCs在无血清培养基中生长旺盛,8天左右就可以形成胞体透亮、折光性好的干细胞球,分化后的细胞显示NSE,GFAP免疫阳性.结论:无血清培养条件下NSCs生长良好,在含血清的培养基中可以分化为神经元和星形胶质细胞.第二部分神经干细胞与体外培养的乳鼠基底膜上清液共培养分化为类毛细胞的研究目的:探讨体外诱导胚胎大鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）分化为类毛细胞的实验研究。方法:从SD系胚鼠大脑分离NSCs,在无血清培养基中培养后将其放到含鼠尾胶原包被的盖玻片的6孔培养板中培养,然后将乳鼠基底膜取出体外培养后汲取其上清液与NSCs一起培养,14-21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa和calretinin,并计算分化比例。结果: NSCs分化后的细胞约有15.4%呈myosin VIIa免疫荧光阳性,21.7%呈免疫组化calretinin阳性。结论:体外培养的乳鼠基底膜上清液能诱导NSCs分化为类毛细胞。第三部分神经干细胞与乳鼠基底膜共培养后分化为类毛细胞的研究目的:探讨体外诱导神经干细胞（neural stem cells,NSCs）分化为类毛细胞的实验研究。方法:从SD系胚鼠大脑分离NSCs,在无血清培养基中培养。取出生3天内乳鼠基底膜与NSCs一起培养,14-21天后通过免疫荧光和免疫组化法检测毛细胞标志物myosin VIIa和calretinin,并计算分化比例。结果: NSCs分化后的细胞约有17.1%呈myosin VIIa免疫荧光阳性,27.4%呈免疫组化calretinin阳性。结论:乳鼠基底膜与NSCs共培养时能引导其朝毛细胞方向分化。
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