导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测人乳头瘤病毒的临床价值初探

论文摘要

目的①分析导流杂交基因芯片（flow-through hybridization gene chip,HybriMax）、实时定量PCR（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）与杂交捕获二代（Hybrid CaptureⅡ,HCⅡ）比较的一致性及其对筛查宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelialneoplasia,CIN）Ⅱ以上病变的临床价值;②初步了解不同宫颈病变的主要HPV亚型分布;③探究HPV负荷量（HPV viral load）与宫颈病变程度之间的关系。方法选取2007年5月18日至2007年10月9日在复旦大学附属妇产科医院宫颈疾病诊疗中心就诊的有性生活史的妇女共103例为研究对象,分为慢性宫颈炎组48例、宫颈扁平湿疣及低级别CIN（CINⅠ）组28例、高级别CIN（CINⅡ、CINⅢ）及宫颈浸润癌组27例。所有研究对象取宫颈脱落细胞行HCⅡ、HybriMax及RT-qPCR检测HPV,同时在阴道镜引导下取宫颈活组织行病理组织学检查。以HCⅡ检测结果为对照分析HybriMax及RT-qPCR检测HPV与HCⅡ的一致性;以组织学诊断为金标准,分析HybriMax及RT-qPCR对筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值;根据HybriMax对HPV的分型检测了解研究对象的HPV各亚型感染分布,并结合组织病理学结果分析不同宫颈病变的主要HPV亚型;根据RT-qPCR对HPV-DNA的定量检测了解HPV负荷量与宫颈病变程度之间的关系。应用SPSS13.0软件进行统计分析,方法包括X2检验、Fisher确切概率法、Kruskal-WallisH检验,P＜0.05定义为统计学有显著差异。结果①导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ的符合率分别为86.41%、96.12%,Kappa值分别为0.72、0.92;导流杂交基因芯片筛查CINⅡ以上病变的灵敏度、阴性预测值为96.30%、97.44%,实时定量PCR为100%、100%。②根据HybriMax对HPV的分型检测,103例中HPV各亚型的感染比例依次为HPV16（28.16%）、HPV58（11.65%）、HPV52（7.77%）。HPV16、31、33型在高级别CIN及宫颈浸润癌组中的感染比例（分别为74.07%、11.11%、11.11%）高于宫颈扁平湿疣及低级别CIN组（分别为28.57%、3.57%、0.00%）和慢性宫颈炎组（分别为2.08%、6.25%、2.08%）;而HPV6、11型在宫颈扁平湿疣及低级别CIN组的感染比例（分别为10.71%、14.29%）高于慢性宫颈炎组（分别为2.08%、0.00%）和高级别CIN及宫颈浸润癌组（分别为3.70%、3.70%）。③根据RT-qPCR对HPV-DNA的定量检测结合病理组织学诊断,HPV负荷量随病变程度的加重而升高。结论①导流杂交基因芯片、实时定量PCR检测HPV与HCⅡ比较有较好的一致性,对于CINⅡ以上病变有较高的灵敏度和阴性预测值,且能行HPV分型及定量,但结果稳定性不够,有一定误诊比例,尚需大样本实验进一步验证。②本研究中,HPV各亚型感染比例居前三位的是HPV16、58、52型。HPV16型是高级别CIN及宫颈浸润癌的主要亚型,而HPV6、11型是宫颈扁平湿疣及低级别CIN的主要亚型。③HPV负荷量随病变程度的加重而升高。

论文目录

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• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 致谢
• 综述