论文摘要
目的:心脏型脂肪酸结合蛋白（Heart-type fatty acid binding protein,H-FABP）是一种小分子蛋白质（14～15kDa）,且有严格的器官特异性。由于其有分子量小、心肌细胞中含量高且为水溶性的特点,当心肌纽胞缺血时,H-FABP很容易迅速地透过细胞膜而漏出到细胞间质,从而进入血液循环。因此被推荐为诊断急性心肌梗死的早期指标之一。本实验采用酶联免疫吸附实验（Enzyme-linked immunosorbent sandwich assay,ELISA）研究自溶对尿液中H-FABP含量的影响;用免疫组织化学染色（Immuniohistochemical staining,IHC）的方法研究自溶对心肌细胞内H-FABP含量的影响。 方法:通过结扎冠状动脉左前降枝的方法建立急性心肌梗死的动物模型。66只健康Wistar大白鼠,重250～300克,雌雄不限,随机分为5个实验组、5个对照组和1个假性对照组,每组六只。10%水合氯醛注射麻醉后气管插管,用动物呼吸机辅助呼吸。切开皮肤和左第四肋间后,在冠状动脉左前降枝根部结扎造成心肌缺血,血管供血区心肌变苍白或心电图ST段上抬≥0.1mv即为结扎成功。假性实验组除了不做结扎手术外其余与实验组同样处理。大鼠冠状动脉结扎4小时后过量麻醉处死,于4℃冰箱中放置0、6、12、24和48小时后分别抽取尿液和取出心脏。用酶联免疫吸附试剂盒对尿液样本进行检测,该试剂盒检测的最低限为0.1μl/L,组内和组间误差小于10%。取出的心脏放入10%PBS福尔马林中固定。24小时后,于梗死区中央取材,按常规方法脱水、包埋。采用Streptavidin-peroxidase conjugated method（S-P法）染色。 结果: 1.正常对照组大鼠死亡当时尿液中的H-FABP浓度是83.93±50.33μg/L,到死后6小时,正常对照组尿液中H-FABP浓度为282.71+164.86μg/L,达到第一个峰值;到死后12小时,正常对照组尿液中H-FABP浓度下降为68.86+59.81μg/L;到死后24小时,正常对照组尿液中H-FABP浓度又上升为327.96+300.87μg/L;48小时后达到第二个峰值为339.29±144.33μg/L。实验组死亡当时的尿液中H-FABP浓度为263.44±67.95μg/L,随着死亡时间的延长,其浓度也呈波浪状上升;6小时后达到第一
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标签：心脏型脂肪酸结合蛋白论文; 早期心肌缺血论文; 免疫组织化学染色论文; 酶联免疫吸附论文; 自溶论文; 器官特异性论文;