论文摘要
食管癌是人类常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率均很高。Ku80是一种DNA结合蛋白,主要参与非同源末端连接修复DNA双链断裂,此外,在维持端粒结构的稳定性,免疫球蛋白V（D）J链重排及调控特定基因转录等方面起着重要作用。近年来研究发现,Ku80蛋白与食管癌的发生和发展密切相关。然而关于Ku80蛋白在食管癌发生、发展中的具体机制目前还未见报道。我们通过对26例食管癌标本和10例食管癌旁标本的免疫组织化学分析,发现在食管癌组织中有高水平的Ku80蛋白表达。进一步检测不同肿瘤细胞系及胚肾细胞系中Ku80蛋白表达得到了相似的结果,在不同肿瘤细胞系中都有高水平的Ku80蛋白表达,且以食管癌细胞系EC9706最高。RNAi技术是近年来新发展起来的研究基因功能的强有力工具,本实验成功构建了pGCshRNA-Ku80载体。通过转染食管癌细胞系EC9706,经G418筛选得到了稳定的Ku80基因沉默食管癌细胞系。研究结果表明,Ku80基因沉默对体外食管癌细胞的增殖、粘附和侵袭能力均有抑制作用。体内实验显示,Ku80基因沉默能抑制食管癌细胞裸鼠移植瘤的生长。Ku80基因沉默能提高γ-射线和丝裂霉素C药物的敏感性,促进γ-射线和MMC诱导食管癌细胞发生凋亡,并使细胞周期阻滞于G2/M期。总之,我们的研究首次为Ku80具有促进肿瘤细胞增殖、粘附和侵袭能力及在食管癌发生、发展起着重要作用提供了实验依据。同时证实了Ku80基因沉默可提高肿瘤细胞对γ-射线和药物的敏感性,为今后应用于临床治疗奠定了理论基础。