蓝玉簪颗粒治疗慢性支气管炎的作用机制研究

论文摘要

慢性支气管炎（chronic bronchitis,CB,简称慢支）是由于多种因素（包括感染、非感染因素）引起下呼吸道粘膜及其周围组织的慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary disease, COPD）。临床上以咳嗽、咳痰或伴有喘息及反复发作的慢性过程为特征。病情若缓慢进展,常并发阻塞性肺气肿,甚至肺源性心脏病。慢性支气管炎的发病原因尚未完全清楚,迄今尚有许多因素还不够明了。近年来认为,环境污染,吸烟,感染,过敏及遗传等因素均可能参与CB的发病过程。随着我国人口的老龄化与环境污染程度的加剧,CB在我国的发病日趋增多,严重地影响着人们的劳动能力和生活质量。目前对于CB的治疗主要采取防治结合的综合措施,急性发作期和慢性迁延期主要以控制感染和祛痰、镇咳为主。伴发喘息时则以解痉平喘治疗为主。目前尚缺乏特异性疗效药物。因此,深入探讨CB发病的病理分子机制,开发研制有效的药物有着十分重要的意义。蓝玉簪龙胆花草是龙胆科龙胆属植物蓝玉簪龙胆（Gentiana veitchiorum Hemsl）的干燥地上部分,具有解毒作用,主治咳嗽、气管炎、咽喉肿疼等。藏成药十味龙胆花颗粒在临床应用中对慢性支气管炎、儿童肺部感染有良好的疗效。具有高效低毒治疗特征。肺泡巨噬细胞（alveolar macrophage, AM）是下呼吸道局部主要的免疫细胞,广泛的分布在肺泡内及气道上皮表面,对肺脏局部的生理病理等方面起着重要调节作用。本课题拟观察蓝玉簪颗粒对动物CB模型的治疗效果,以及对模型动物肺组织内氧化-抗氧化平衡的调节,进一步以肺泡巨噬细胞（AM）为研究靶点,探讨蓝玉簪颗粒对CB治疗作用的可能机制,为新药开发提供实验依据。主要研究内容如下:实验一蓝玉簪颗粒治疗小鼠慢性支气管炎作用机理的研究目的观察蓝玉簪颗粒治疗实验性小鼠慢性支气管炎的作用。方法60只雌性昆明种小鼠随机分为正常对照组、慢性支气管炎氨水模型组、蓝玉簪颗粒高、中、低剂量治疗组、复方气管炎片治疗组。除正常对照组外,各组小鼠均在YLS 28A多功能诱咳引喘仪中定时给予氨水雾化吸入,共30d,诱导慢性支气管炎模型。第31日起,对照组小鼠及模型组动物给予生理盐水灌胃,其余各组给予相应的药物进行治疗,1次/d,共15d。治疗结束后,检测各组小鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）水平,应用HE染色观察各组小鼠肺组织病理学改变。结果蓝玉簪颗粒组与慢性支气管炎模型组相比,肺匀浆中MDA含量下降,肺匀浆SOD的含量上升,变化程度与用药量呈量效关系;HE染色观察到蓝玉簪颗粒治疗后慢性支气管炎炎症程度得到明显改善。结论蓝玉簪颗粒具有对氨水诱导慢性支气管炎的治疗作用,其机理可能是蓝玉簪颗粒对抗氧化损伤,增强机体抗氧化酶的活力,调节氧化-抗氧化平衡,从而起到治疗慢性支气管炎的作用。实验二蓝玉簪颗粒对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞（AM）TNF-α表达及相关机制研究目的探讨蓝玉簪颗粒对脂多糖（LPS）诱导大鼠肺泡巨噬细胞（AM）内TNF-α表达及可能作用机制。方法分离纯化AM,应用ELISA法检测蓝玉簪颗粒对LPS诱导的大鼠AM培养上清液中的TNF-α水平的影响,应用Western blot方法检测大鼠AM内TNF-α及pERK蛋白表达水平,同时应用ERK拮抗剂（PD98059）观察AM内TNF-α蛋白表达。结果蓝玉簪颗粒可剂量依赖的降低由于LPS刺激导致的AM培养上清液内TNF-α含量升高;蓝玉簪（100 mg/L）颗粒可显著降低由于LPS刺激导致的AM细胞内pERK及TNF-α蛋白表达升高;应用ERK特异性抑制剂（PD98059）蓝玉簪颗粒及蓝玉簪颗粒+PD98059干预后,我们发现与LPS刺激组相比,大鼠AM中TNF-α表达显著降低。结论蓝玉簪颗粒可以显著抑制LPS诱导AM TNF-α表达,从而阻断AM所诱发炎症,其作用的机制之一可能与蓝玉簪抑制细胞外信号转导通路有关。

论文目录

• 缩略语表
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 文献回顾
• 一、细胞学基础
• 二、气道炎症和气道重塑
• 三、炎性介质与细胞因子
• 四、炎性与个体因素
• 五、炎性与环境因素
• 六、氧化应激
• 七、蓝玉簪颗粒研究基础
• 八、慢性支气管炎
• 实验一 蓝玉簪颗粒治疗小鼠慢性支气管炎作用机理的研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 实验二 蓝玉簪颗粒对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞（AM）TNF-α表达及相关机制研究
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 小结
• 参考文献
• 个人简历和研究成果
• 致谢