论文摘要
石墨烯是Sp2杂化碳原子形成的单原子层二维原子晶体,厚度为0.35 nm。石墨烯仅含碳原子,不溶于水,经氧化可制得氧化石墨烯（GO）。GO含大量羟基和羧基等含氧基团,水溶性好,但因静电屏蔽效应和非特异性蛋白吸附致使其生理环境中稳定性差,易聚集沉淀,故用作给药载体需对GO进行修饰。GO经表面修饰可提高生物相容性和稳定性；靶向配体修饰可增强主动靶向性,提高细胞摄取效率。壳聚糖季铵盐（TMC）水溶性好,荷正电,可经静电作用结合荷负电的GO。本文共价连接靶向配体叶酸（FA）至TMC制得FA修饰的TMC（FTMC）;由FTMC非共价修饰GO制得GO-FTMC,分别包载难溶性抗肿瘤药物阿霉素（DOX）和质粒DNA （pDNA）;考察其细胞毒性和细胞摄取。石墨经氧化及超声剥离制得GO粗产物,离心去除未氧化完全及未剥离完全的大片段GO后制得分散性好的GO悬浮液。原子力显微镜（AFM）观察表明GO厚度为0.838 nm；动态光散射（DLS）测定结果表明GO的粒径和Zeta电势分别为87.7 nm和-32.9 mV,粒径均一。FA经酰胺反应共价连接至TMC制得FTMC;核磁共振氢谱（1HNMR）表明FTMC图谱中7.14、7.76和8.82 ppm处出现FA特征峰,表明FA已连接至TMC。FTMC与GO经水浴超声形成GO-FTMC,厚度为3.038 nm,粒径和Zeta电势分别为112.0 nm和30.9 mV。GO-FTMC经π-π、疏水和氢键相互作用包载DOX制得GO-FTMC-DOX纳米复合物,粒径和Zeta电势分别为116.1 nm和27.0 mV；GO-FTMC对DOX的载药量为30.9%,包封率为44.7%。体外释药结果表明pH 7.4时,DOX的释放为先突释后缓释,24 h累计释放量为33.3%。调节GO与FTMC的质量比,包载pDNA,制得8种GO-FTMC-pDNA纳米复合物。DLS测定结果表明FTMC与GO的质量比从9：5增至14：5时,纳米复合物的粒径为120-150 nm, Zeta电势由19 mV增至24 mV。凝胶阻滞结果表明8种GO-FTMC-pDNA纳米复合物均可有效缩合pDNA,阻滞pDNA的电泳。水溶性四唑盐（WST-8）法考察GO-FTMC的细胞毒性；结果表明48 h内,0.01-80μg/mL GO-FTMC不影响A549和Hela细胞的增殖。以罗丹明B （RhB）标记GO-FTMC,考察A549和Hela细胞对GO-FTMC的摄取；共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）观察结果表明与FA受体低表达的A549细胞相比,FA受体高表达的Hela细胞对GO-FTMC的摄取量较高,表明GO-FTMC可经配体-受体特异性相互作用主动靶向入胞。
论文目录
相关论文文献
标签：氧化石墨烯论文; 壳聚糖季铵盐论文; 叶酸论文; 阿霉素论文; 质粒论文; 纳米复合物论文; 细胞论文; 毒性论文; 细胞摄取论文;