论文题目: 填饲诱导鹅肥肝形成差异及调控肝极低密度脂蛋白—甘油三酯组装与分泌相关基因的表达研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 动物遗传育种与繁殖
作者: 蒋立
导师: 朱庆
关键词: 填饲,肝脂肪变性,脂肪沉积,组装与分泌,基因表达
文献来源: 四川农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 在动物肝细胞内，甘油三酯（TAG）的异常沉积导致肝脂肪变性。在实验模式动物中，肝脂肪变性的一个重要因素是VLDL-TAG的形成与分泌受到了抑制。对鹅和鸭填饲高能碳水化合物诱发肝脂肪变性，而获得经济价值极高的肥肝。但是，对填饲所诱发的肥肝及肝外脂肪沉积差异的具体机制目前仍不清楚。本研究以产肝性能较好的朗德鹅和产肝性能中等的四川白鹅为实验材料，对填饲诱导鹅肥肝形成差异及调控VLDL-TAG组装与分泌的相关基因表达进行研究，取得了如下结果： 1．在单位体重填饲等量高能碳水化合物的情况下，填饲两周后，朗德鹅与四川白鹅的肝脂质中TAG含量已超过90％；朗德鹅的肝重率和肝脂质含量极显著地高于四川白鹅（肝重率：8.55％ VS 6.07％；肝脂质含量：46.87％ VS 38.47％）；但是与对照组相比，朗德鹅皮脂率及腹脂率的增加均显著低于四川白鹅。结果表明，朗德鹅肝脏利用食物中的碳水化合物合成的脂类优先贮存在肝脏；而四川白鹅肝脏合成的脂类却能更好地在肝脏和脂肪组织之间进行分配，脂类贮存在脂肪组织的效率更高。 2．填饲后，朗德鹅与四川白鹅的血浆VLDL和TAG浓度是对照组的2倍；四川白鹅的血浆VLDL水平显著高于朗德鹅，且与肝重显著正相关，这表明四川白鹅血浆中VLDL水平是肝中脂质合成与外周组织脂质的吸收利用之间一个较好的平衡因素。 3．在朗德鹅与四川白鹅肝脏、小肠、脂肪组织、肌肉组织、睾丸中检测到DGAT2的表达；LPL基因在脂肪组织、骨骼肌、心肌、脑和睾丸中表达，但在肝与小肠中不表达；MTP不仅在肝脏与小肠中表达，而且在脑中也有表达。填饲结束时，在朗德鹅与四川白鹅肝脏中有DGAT2与MTP基因的表达，在胸肌、腿肌、皮脂和腹脂中有LPL基因的表达。 4．填饲下调四川白鹅与朗德鹅肝组织中TGH、DGAT2酶活性及DGAT2、MTP mRNA表达，上调脂肪组织与肌肉组织中LPL的表达。填饲后，朗德鹅与四川白鹅肝组织中DGAT2酶比活性及朗德鹅的DGAT2 mRNA表达丰度显著低于对照组；朗德鹅与四川白鹅肝素后血浆中的LPL活性极显著地高于对照组。 5．填饲组中，朗德鹅血浆胰岛素浓度、肝组织DGAT2 mRNA表达水平及其酶比活性显著低于四川白鹅（P＜0.05），其值分别为：10.28与11.53（mmol／l）、1.23与1.41及2.24与2.95(10-1 nmol Tripalmitoylglycerol／min／mg microsomal protein)。并且
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中文摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文献综述
1 肝脂蛋白VLDL组装与分泌的研究
1.1 甘油三酯(TAG)组装成VLDL的成因
1.2 VLDL的组装过程
1.3 影响VLDL生成和分泌的研究
2 脂质代谢特异基因的表达差异研究
2.1 基因的表达
2.2 脂质代谢特异基因的表达差异研究
3 TGH、DGAT2、MTP和LPL的研究及其与VLDL生成和分泌的关系
3.1 TGH的研究及其与VLDL生成和分泌的关系
3.2 DGAT2的研究及其与VLDL生成和分泌的关系
3.3 MTP的研究及其与VLDL生成和分泌的关系
3.4 LPL的研究及其与VLDL生成和分泌的关系
4 肥肝形成机理及填饲的影响
4.1 肝脂肪变性发生的机制
4.2 填饲对肝内与肝外脂肪沉积影响的研究
5 本研究的目的与意义
第二章 填饲诱导鹅脂肪沉积及血浆参数的差异研究
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物及饲养
2.2 样品的采集
2.3 主要仪器与试剂
2.4 测定指标及测定方法
2.5 数据的统计分析
3 结果分析
3.1 填饲诱导的脂肪差异
3.2 填饲诱导的血浆参数差异
3.3 血浆参数间及与肝脂质中TAG含量的相关
3.4 血浆TAG、VLDL浓度与体组成的相关
4 讨论
4.1 填饲对鹅体脂肪沉积和血浆参数的影响
4.2 血浆参数与脂肪性状的相关关系
5 小结
第三章 与VLDL-TAG形成、分泌相关基因的表达特性
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验动物与样品采集
2.2 主要仪器与试剂
2.3 组织中MTP、DGAT2和LPL基因mRNA表达检测
2.4 数据的处理与统计分析
3 结果分析
3.1 总RNA的提取和纯化及cDNA合成
3.2 MTP、DGAT2、LPL基因表达组织特性分析
3.3 与VLDL-TAG分泌相关基因的mRNA表达差异
4 讨论
4.1 关于组织RNA的提取和纯化
4.2 基因表达的时空性
4.3 特异基因mRNA表达丰度的量化
5 小结
第四章 参与VLDL-TAG组装、分泌的蛋白质在鹅填饲脂肪沉积中的表达与调控
1 前言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 主要仪器与试剂
2.3 测定指标及测定方法
2.4 实验数据的利用、处理与统计
3 结果分析
3.1 酶活性及其与mRNA表达丰度的关系
3.2 特异基因表达与肝脂质TAG含量及血浆参数的关系
3.3 基因表达差异与组织差异生长的关系
4 讨论
4.1 鹅肝脂质分泌代谢反应的表达调控
4.2 基因表达对肝脂质TAG贮存与分泌的调节
4.3 基因表达差异在填饲诱导鹅脂肪沉积中的作用
5 小结
第五章 结论
主要参考文献
附录
附录1 所用缓冲液的配制
附录2 本实验RT-PCR时所用引物
附录3 填饲组的饲养管理、填饲饲料调制及填饲操作方法
附录4 常用词语缩写表
附录5 攻读博士期间发表的论文
致谢
发布时间: 2006-11-01
参考文献
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