论文摘要
目的:观察凋亡素(VP3)基因真核表达质粒对卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长的抑制作用。 方法:构建pcDNA-VP3真核表达质粒。人卵巢癌(COC1)细胞裸鼠异种移植瘤模型治疗实验,观察pcDNA-VP3质粒的体内抗肿瘤作用。实验裸小鼠分为四组,每组3只。高剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,100μg/只);低剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,50μg/只);空载体对照组(pcDNA3.1(+)质粒DNA,瘤内注射,100μg/只);脂质体对照组(脂质体,瘤内注射,0.2ml/只)。每三天测量皮下移植瘤长、宽径,按标准公式V=L×W2×0.52计算移植瘤体积。12天后处死裸鼠,称取瘤重。RT-PCR检测皮下移植瘤组织凋亡素基因表达状况。TUNEL法观察凋亡素对皮下移植瘤细胞凋亡程度的影响。 结果:(1) 成功构建了pcDNA-VP3真核表达质粒。 (2) pcDNA-VP3高剂量组和低剂量组卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑制,高剂量实验组肿瘤生长抑制率为76%(p<0.05),瘤重抑制率为71.9%(p<0.05)。低剂量组肿瘤生长抑制率为52%(p<0.05),瘤重抑制率为49.5%(p<0.05)。 (3) 凋亡素基因在裸鼠皮下移植瘤mRNA水平表达。 (4) TUNEL试验结果表明凋亡素在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡。 结论:(1)、成功地构建重组凋亡素基因真核表达质粒pcDNA-VP3。
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