论文摘要
目的：黏膜相关淋巴组织（mucosa associated lymphoid tissue，MALT）是人体CD4+T细胞的主要储存部位，研究人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）感染对粘膜中CD4+T细胞和黏膜局部免疫功能的影响，将有助于深化对HIV感染和获得性免疫缺陷综合征（acquired immune deficiency syndrome，AIDS）发病机制的认识，并为HIV感染的治疗提供新的潜在的干预途径和方法。本研究拟通过对HIV感染者胃黏膜中CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、B细胞等免疫细胞变化、免疫状态改变及胃黏膜HIV感染状况的研究，阐述胃肠黏膜免疫与HIV感染之间的关系，为进一步探讨HIV／AIDS的感染和发病机制提供依据。方法：收集HIV感染者胃镜活检或尸检胃黏膜组织，常规中性甲醛固定，石蜡包埋。1．采用原位杂交（in situ hybridization，ISH）和免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）方法，检测HIV感染者尸检胃黏膜组织中HIV感染状况。2．采用IHC法检测HIV感染者活检胃黏膜组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、B细胞的数量及分布状况，探讨HIV感染对胃黏膜内免疫细胞的影响。3．采用银染和IHC法，检测HIV感染者活检胃黏膜组织中幽门螺旋杆菌（helicobacter pylori，Hp）的感染情况。4．采用IHC法观察活检胃黏膜组织中CD38、Ki-67的表达，评价HIV感染胃黏膜内免疫细胞增生与激活的改变。5．采用Masson三色染色法，观察HIV感染后胃黏膜组织中胶原纤维的沉积。结果：1．HIV在胃黏膜中的感染状况：（1）HIV感染者胃黏膜内HIVgag区基因不仅见于CD4+T细胞等免疫细胞中，少数胃黏膜上皮、腺上皮、小凹内上皮细胞和间质梭形细胞中亦有阳性杂交信号；（2）HIV感染者尸检胃黏膜内HIVp24蛋白于T细胞、浆细胞及少部分胃黏膜黏膜上皮、腺上皮及小凹上皮细胞中呈阳性表达。2．HIV感染无症状者和AIDS患者胃黏膜活检组织中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞、B细胞的数量及分布：与非HIV感染对照组相比，（1）AIDS患者胃黏膜内CD4+T细胞显著减少（P＜0.01），而无症状者与对照组无显著差异（P＞0.05）；（2）胃黏膜内CD3+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞（CD57+）显著增加（P＜0.01），并呈现较明显普遍性噬胃黏膜上皮和腺体现象；（3）各组胃黏膜内CD20+B淋巴细胞的数量分布变化不明显。3．采用银染和IHC方法检测HIV感染者Hp感染情况：HIV感染者胃黏膜活检组织中，Hp感染率为33.3％（14／42），其中无症状者Hp感染率高达50％（5／10），明显高于非HIV感染对照组（3／10）（P＜0.01）。4．HIV感染无症状者和AIDS患者胃黏膜活检组织中CD38、Ki-67的表达：与非HIV感染对照组比较，Ki-67表达显著减少，而CD38表达呈明显上调改变。5．HIV感染无症状者和AIDS患者胃黏膜组织中固有淋巴滤泡部位可见不同程度胶原纤维沉积，固有层间质不同程度细胞外基质增生。结论：1．研究发现，HIV-1不仅可以感染CD4+T细胞，并可感染胃黏膜上皮、腺上皮及小凹上皮细胞，以及少数间质细胞，研究结果显示胃黏膜是HIV免疫系统外感染的靶部位之一，胃黏膜上皮及腺上皮细胞等是HIV感染的靶细胞之一。2．HIV感染胃黏膜呈不同程度的炎症反应，间质增生，黏膜上皮及腺上皮变性、凋亡，固有淋巴滤泡萎缩纤维化，提示HIV／AIDS疾病的进程与胃黏膜局部病理改变之间可能存在一定关联性。3．AIDS患者胃黏膜内CD4+T细胞显著减少，CD8+T细胞、NK细胞等免疫细胞呈相对增生性改变，HIV感染无症状者及AIDS患者胃黏膜内CD8+T细胞、NK细胞噬黏膜上皮及噬腺体现象普遍且明显，而胃黏膜内CD20+B细胞的数量及分布改变较轻。结果提示HIV感染可能导致胃黏膜局部免疫细胞数量、比例及功能异常，致黏膜局部免疫状态失调。CD8+T细胞、NK细胞（CD57+）噬胃黏膜上皮及腺体现象推测可能与HIV感染胃黏膜上皮、腺上皮细胞及黏膜局部细胞免疫和天然免疫功能异常有关。4．Hp感染率在HIV感染者中上升，而无症状者感染率更高，提示黏膜局部免疫细胞功能的缺陷或紊乱可能较免疫细胞数量的减少对黏膜局部包括抗感染能力在内的免疫功能影响更大。5．根据HIV感染无症状者和AIDS患者胃黏膜内Ki-67和CD38表达改变，以及胶原纤维沉积情况，提示HIV的感染可导致胃黏膜中免疫细胞增殖能力失衡，表型激活异常，并推测可能为胃黏膜局部免疫细胞过度消耗致MALT渐进性破坏的机制之一。
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