天然红心鸭蛋蛋黄粉的生物活性及作用机理研究

天然红心鸭蛋蛋黄粉的生物活性及作用机理研究

论文摘要

我国是禽蛋的产销大国,禽蛋含有丰富的不饱和脂肪酸和氨基酸,具有很高的生物效价,因而深受消费者的喜爱。本文旨在利用现代色谱技术,建立天然红心鸭蛋蛋黄中胆固醇高效准确的定量分析方法;并通过动物实验和分子生物学分析手段和方法,探讨天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠生长发育、抗疲劳、耐缺氧、兔疫调节以及对血脂的影响和作用机理。主要研究结果如下: 1.天然红心鸭蛋蛋黄粉中主要成分的分析 建立了一种通过直接皂化—反相高效液相色谱(RPHPLC)快速检测蛋黄胆固醇含量的分析方法,其RPHPLC分析测定条件为:LC-10AT液相色谱;色谱柱:AgilentZorbax SB-C18柱(φ4.6mm×250mm);流动相:乙睛:甲醇:异丙醇=50:80:10(v/v/v);柱温:45℃;进样量:20μL;流速v=1.3mL/min;检测波长205nm。在此分析条件下,蛋黄中胆固醇的出峰时间在10min左右,测得天然红心鸭蛋蛋黄粉和普通鸭蛋蛋黄粉中胆固醇含量分别为24.84mg/g左右和25.75mg/g左右。 通过气相色谱(GC)分析了蛋黄粉中脂肪酸的组成和含量。其中天然红心鸭蛋蛋黄粉中不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的71.9%,占蛋黄粉量的29.75%。普通鸭蛋蛋黄粉中不饱和脂肪酸占脂肪酸总量的72.5%,占蛋黄粉的26.44%。天然红心鸭蛋蛋黄粉和普通鸭蛋蛋黄粉中还含有亚油酸(LA)、花生四烯酸(AA)、廿碳五烯酸(EPA)、廿二碳六烯酸(DHA)以及少量的C16:1、C17:1、C20:1和C20:2等不饱和脂肪酸等。 通过高效液相色谱(HPLC)分析了蛋黄粉中氨基酸的组成和含量。其中天然红心鸭蛋蛋黄粉中氨基酸总含量约为占21.28g/100g,普通鸭蛋蛋黄粉中氨基酸含量约为24.86g/100g。 2.天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠生长发育的影响 动物分组实验结果表明,天然红心鸭蛋蛋黄粉能够增加生长小鼠的体重。 通过病理切片观察小鼠脾脏组织:发现天然红心鸭蛋蛋黄粉增加了小鼠脾脏中自小体(white pulp,白髓)的体积和数量,这提示天然红心鸭蛋蛋黄粉有提高机

论文目录

  • 中文摘要
  • ABSTRACT
  • 缩写语表
  • 第一章 绪论
  • 1.国内外对禽蛋功能因子及其生理活性的研究状况
  • 1.1 蛋黄中胆固醇(cholesterol)和脂肪酸(fatty acid)的含量及其与血脂的关系
  • 1.1.1 蛋黄中胆固醇(cholesterol)的含量
  • 1.1.2 蛋黄中脂肪酸(fatty acid)的含量及其组成
  • 1.1.3 胆固醇与心血管疾病的关系
  • 1.1.4 脂肪酸与心脑血管疾病的关系
  • 1.1.5 蛋黄粉对血脂水平影响的研究
  • 1.2 蛋黄中磷脂(phospholipid)及其功能特性
  • 1.2.1 蛋黄磷脂组成
  • 1.2.2 蛋黄磷脂的生物活性
  • 1.3 蛋黄中LDL的功能特性
  • 1.4 蛋黄中类胡萝卜素的成分及其功能的研究
  • 1.5 蛋黄中的涎酸(sialic acid)以及涎酸低聚糖
  • 1.5.1 蛋黄中的涎酸(sialic acid)
  • 1.5.2 蛋黄中的涎酸低聚糖
  • 1.6 蛋黄免疫球蛋白(immunity globin of yolk)
  • 1.7 其它活性成分
  • 1.7.1 禽蛋中的溶菌酶(lysozyme)
  • 1.7.2 禽蛋寡肽(oligopeptide)
  • 1.7.3 蛋黄油(egg yolk oil)
  • 2.国内外对天然红心鸭蛋的研究
  • 3.本课题研究的目的和意义
  • 4.本课题研究的主要内容
  • 参考文献
  • 第二章 天然红心鸭蛋蛋黄粉中主要成分的分析
  • 第一节 前言
  • 第二节 材料与方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验试剂
  • 2.3 试验仪器与设备
  • 2.4 实验方法
  • 2.4.1 胆固醇含量的测定及其条件的确定
  • 2.4.1.1 胆固醇标准溶液的配制
  • 2.4.1.2 测试样品液的制备
  • 2.4.1.3 RP-HPLC测定条件的确定
  • 2.4.1.3.1 检测波长的确定
  • 2.4.1.3.2 流动相溶剂系统的确定
  • 2.4.1.3.3 柱温的确定
  • 2.4.1.3.4 改变流速对分离效果的影响
  • 2.4.1.4 液相色谱测定结果计算方法
  • 2.4.1.5 重现性的测定
  • 2.4.1.6 回收率实验
  • 2.4.2 脂肪酸含量的测定
  • 2.4.3 氨基酸的含量及成分分析
  • 第三节 结果与分析
  • 3.1 RP-HPLC测定天然红心鸭蛋蛋黄粉中胆固醇条件的建立
  • 3.1.1 流动相溶剂系统的确定
  • 3.1.2 检测波长的确定
  • 3.1.3 柱温的确定
  • 3.1.4 流速对分离效果的影响
  • 3.1.5 RP-HPLC测定胆固醇的标准曲线绘制
  • 3.1.6 鸭蛋蛋黄粉中胆固醇含量的测定
  • 3.1.7 重现性实验
  • 3.1.8 回收率实验
  • 3.2 脂肪酸成分分析
  • 3.3 氨基酸成分分析
  • 第四节 讨论
  • 参考文献
  • 第三章 天然红心鸭蛋蛋黄粉对断乳小鼠生长发育的影响
  • 第一节 前言
  • 第二节 材料及方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 化学试剂
  • 2.3 实验仪器
  • 2.4 实验动物分组与喂养
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 观察小鼠生长情况及体重的变化
  • 2.5.2 脏器重量及其指数的测定
  • 2.5.3 血细胞含量的测定
  • 2.5.4 心、肝、脾、肾病理切片观察
  • 2.5.5 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠生长发育中生化指标的影响
  • 2.5.5.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠脑、肺、肝脏等器官过氧化脂质(LPO)的影响
  • 2.5.5.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠肝、肾功能指标的影响
  • 2.5.5.3 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠血清脂质的影响
  • 2.6 统计学方法
  • 第三节 结果及分析
  • 3.1 一般观察和大体解剖观察
  • 3.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠体重变化的影响
  • 3.3 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠脏器重及脏器指数的影响
  • 3.4 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠免疫器官重量及其指数的影响
  • 3.5 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠血细胞含量的影响
  • 3.6 病理切片观察
  • 3.6.1 小鼠肾脏的病理切片观察
  • 3.6.2 小鼠心脏的病理切片观察
  • 3.6.3 小鼠脾脏的病理切片观察
  • 3.6.4 小鼠肝脏的病理切片观察
  • 3.7 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠生长发育中生化指标的影响
  • 3.7.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠脑、肺、肝脏等器官过氧化脂质(LPO)的影响
  • 3.7.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠肝、肾功能指标的影响
  • 3.7.3 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠血清脂质含量的影响
  • 第四节 讨论
  • 4.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠体重的影响
  • 4.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠肝脏的影响
  • 4.3 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠心脏和肾脏的影响
  • 4.4 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠胸腺和脾脏的影响
  • 4.5 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠血象指数的影响
  • 参考文献
  • 第四章 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠抗疲劳和耐缺氧的效果
  • 第一节 前言
  • 第二节 材料与方法
  • 2.1 材料
  • 2.2 试剂
  • 2.3 仪器
  • 2.4 动物分组与喂养
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 游泳运动耐力测定
  • 2.5.2 密闭缺氧实验
  • 2.5.3 肌糖原和肝糖原含量的测定
  • 2.5.4 乳酸脱氢酶(LDH)和血清尿素氮(BUN)含量的测定
  • 2.5.5 一氧化氮(NO)含量的测定
  • 2.6 统计学方法
  • 第三节 结果与分析
  • 3.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠运动耐力和耐缺氧的影响
  • 3.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠肌糖原和肝糖原含量的影响
  • 3.3 天然红心鸭蛋蛋黄粉对运动后小鼠乳酸脱氢酶和BUN的影响
  • 3.4 天然红心鸭蛋蛋黄粉对运动后小鼠NO含量的影响
  • 第四节 讨论
  • 参考文献
  • 第五章 天然红心鸭蛋蛋黄粉对正常小鼠免疫功能的影响
  • 第一节 前言
  • 第二节 材料及方法
  • 2.1 材料
  • 2.2 试剂及配制方法
  • 2.2.1 实验试剂
  • 2.2.2 主要试剂配制方法
  • 2.3 试验仪器
  • 2.4 动物
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对正常小鼠迟发性超敏反应(DTH)的影响
  • 2.5.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对正常小鼠血清溶血素含量的影响
  • 2.5.3 小鼠血清免疫球蛋白(IgG)含量和T细胞分子表面标记分子含量的测定
  • 2.6 统计学方法
  • 第三节 结果与分析
  • 3.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对正常小鼠迟发性超敏反应(DTH)的影响
  • 3.2 天然红心鸭蛋蛋黄粉对正常小鼠血清溶血素含量的影响
  • 3.3 小鼠血清中IgG和脾细胞悬液中T细胞表面标记分子—CD3和CD4分子的含量
  • 第四节 讨论
  • 参考文献
  • 第六章 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠肝脏的影响及其机理的研究
  • 第一节 前言
  • 第二节 材料和方法
  • 2.1 实验材料
  • 2.2 实验试剂
  • 2.3 实验仪器
  • 2.4 实验动物分组与喂养
  • 2.5 实验方法
  • 2.5.1 小鼠血清胆碱酯酶活性的测定
  • 2(TXB2)和6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)的含量'>2.5.2 放免法测定肝脏组织中血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)的含量
  • 2.5.3 RT-PCR测定小鼠肝脏组织硬脂酰CoA去饱和酶-1(SCD-1)mRNA和肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)mRNA的表达
  • 2.6 统计学方法
  • 第三节 结果与分析
  • 3.1 天然红心鸭蛋蛋黄粉对小鼠血清胆碱酯酶(CHE)活性的影响
  • 2(TXB2)和6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)的含量'>3.2 放免法测定肝脏组织中血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)的含量
  • 3.3 RT-PCR测定禽蛋对小鼠肝脏组织硬脂酰CoA去饱和酶-1(SCD-1)mRNA和肝脏脂肪酸结合蛋白(L-FABP)mRNA表达的影响
  • 3.3.1 实时PCR分析SCD-1、L-FABP和β-actin的扩增产物
  • 3.3.2 RT-PCR的产物的相对表达量
  • 第四节 讨论
  • 参考文献
  • 第七章 结论
  • 论文创新点
  • 致谢
  • 博士期间论文发表情况
  • 相关论文文献

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