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前列腺增生的5α-还原酶抑制与光动力学疗法

2020-11-22阅读(301)

前列腺增生的5α-还原酶抑制与光动力学疗法

论文摘要

良性前列腺增生（BPH）是常见的、多发性的男性老年病之一。由于前列腺增生 使尿道变得狭窄从而引起排尿障碍,因此BPH是老年男性尿急、尿频和排尿困难的 主要原因。随着社会的老龄化日趋明显,对BPH的治疗已引起广泛关注,其治疗方-- 法的研究也就具有十分重要的意义。对此,本文提出了一种前列腺增生的新疗法--5α 还原酶抑制与光动力学疗法,同时提出了5α-还原酶抑制剂的高效液相色谱评价与筛 选模型,利用该模型对天然产物进行了筛选,确定了白芥子乙醇提取物为5α-还原酶 的抑制剂,研究了白芥子的乙醇提取及其药效。然后概述了光敏剂、光动力学疗法, 研究了光动力学疗法在前列腺增生中的应用。本文的研究工作包括以下三个部分:第一部分:天然产物白芥子的乙醇提取及其药效确定本部分以乙醇为溶剂采用溶剂提取法对白芥子的提取工艺做了研究,考察了提取 溶剂浓度、白芥子粒度、提取次数、料液比、提取温度及提取时间对提取率的影响, 确立了乙醇提取白芥子的最佳工艺条件:选用80%乙醇/水作为提取溶剂;白芥子粒 度为40目;提取2次;料液比为1:6;浸提温度80口;浸提时间8h,在此工艺条 件下白芥子的提取率可达9.52%。同时,设立正常对照组、动物模型组以及白芥子乙 醇提取物三种剂量（3 0mg/kg/d、60mg/kg/d和1 20mg/kg/d）治疗组,用丙酸睾酮诱导 的小鼠前列腺增生模型确定了白芥子乙醇提取物的药效。结果表明白芥子乙醇提取物 能明显抑制丙酸睾酮诱发的小鼠前列腺增生（p<0.05）,减轻小鼠前列腺的湿重,降低 血清酸性磷酸酶（ACP）的活性,提示白芥子乙醇提取物对丙酸睾酮诱导的前列腺增 生具有治疗作用。第二部分:5α-还原酶抑制剂的高效液相色谱法体外筛选和评价模型的建立建立了一种体外筛选和评价甾体5α-还原酶抑制剂的高效液相色谱（HPLC）模 型。确定了测定甾体5α-还原酶活性的液相色谱条件:Lichrospher-RpC18,5μm, 250mmx3.9mm;温度:室温;检测波长:254nm;流动相配比:甲醇/水,70:30(VN 1; 流速:0.7mL/min。在此色谱条件下,15min之内实现了对底物睾酮与其它物质的分 离,测得睾酮的精密度为2.5-3.6%,回收率为89.70%-95.52%,证明了高效液相色谱 法是测定甾体50r-还原酶活性的一种简便有效的分析方法。在确定的色谱条件下,测 定了大鼠肝脏甾体50r-还原酶活性,将数据按Lineweaver-Burk倒数法作图,求得非 那甾胺抑制常数Ki=1.140.23tmol/L,爱普列特抑制常数Ki=4.32±0.38tmol/L,白芥

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 目录
  • 第一章 前言
  • 第二章 文献综述
  • 2.1 良性前列腺增生（BPH）的发病机制与治疗概况
  • 2.1.1 前列腺的结构与功能
  • 2.1.2 BPH 的发病率与临床症状
  • 2.1.3 BPH 的发病机理
  • 2.1.4 BPH 的治疗概况
  • 2.2. 5α-还原酶抑制剂的研究进展
  • 2.2.1 5α-还原酶的研究概况
  • 2.2.2 5α-还原酶抑制剂的研究概况
  • 2.3 光动力学疗法的研究进展
  • 2.3.1 光动力疗法的基本原理
  • 2.3.2 光敏剂
  • 2.3.3 光敏剂的激发光源
  • 2.3.4 光动力学疗法的应用进展
  • 2.3.5 问题与前景
  • 第三章 天然产物白芥子的乙醇提取及其药效确定
  • 3.1 实验材料与设备
  • 3.1.1 实验材料
  • 3.1.2 实验仪器与设备
  • 3.2 白芥子有效成分提取工艺流程
  • 3.3 白芥子提取物得率的计算
  • 3.4 提取工艺参数对提取率的影响
  • 3.4.1 提取溶剂对提取率的影响
  • 3.4.2 白芥子粒度对提取率的影响
  • 3.4.3 提取次数对提取率的影响
  • 3.4.4 料液比对提取率的影响
  • 3.4.5 提取温度对提取率的影响
  • 3.4.6 提取时间对提取率的影响
  • 3.4.7 最佳提取工艺条件
  • 3.5 白芥子乙醇提取物的药效确定
  • 3.5.1 动物模型:前列腺增生模型
  • 3.5.2 实验方法
  • 3.5.3 白芥子乙醇提取物的药效确定结果
  • 3.6 讨论
  • 3.7 本章小结
  • 第四章 甾体5α-还原酶抑制剂的高效液相色谱法体外筛选和评价模型
  • 4.1 实验材料与设备
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 甾体5α-还原酶的制备
  • 4.2.2 标准溶液的配制
  • 4.2.3 药物溶液的配制
  • 4.2.4 甾体5α-还原酶液蛋白的定量
  • 4.2.5 甾体5α-还原酶活性HPLC 分析条件的摸索
  • 4.2.6 高效液相色谱法筛选5α-还原酶活抑制剂
  • 4.3 结果与讨论
  • 4.3.1 蛋白质定量结果
  • 4.3.2 高效液相分析条件的确定
  • 4.3.3 工作曲线及精密度和回收率的测定
  • 4.3.4 HPLC 分析反应混合液
  • 4.3.5 5α-还原酶活性测定分析结果
  • 4.4 本章小结
  • 第五章 光动力学疗法去除大鼠前列腺增生的实验研究
  • 5.1 实验材料与设备
  • 5.1.1 实验药品与试剂
  • 5.1.2 实验仪器与设备
  • 5.1.3 光敏剂
  • 5.1.4 实验动物
  • 5.2 实验方法
  • 5.2.1 大鼠前列腺增生动物模型的建立
  • 5.2.2 动物实验分组和处理因素（n=动物数）
  • 5.2.3 给药方法
  • 5.2.4 照光方法
  • 5.2.5 检测指标和方法
  • 5.2.6 结果处理
  • 5.3 结果与讨论
  • 5.3.1 BPH 动物模型的评价
  • 5.3.2 单纯照光和单纯光敏剂对大鼠前列腺增生细胞的杀伤效应
  • 5.3.3 激光的激发时间对PDT 选择性损伤的影响
  • 5.3.4 不同光敏剂对大鼠前列腺增生细胞杀伤效应的比较
  • 5.3.5 以血啉甲醚为光敏剂不同治疗参数下杀伤效应的比较
  • 5.3.6 PDT 治疗前后大鼠前列腺组织形态学观察
  • 5.3.7 白芥子乙醇提取物和PDT 协同治疗结果
  • 5.4 本章小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历与在学期间发表的学术论文

    • 相关论文文献

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