论文题目: 嘧肽霉素抗烟草花叶病毒（TMV）作用机制研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 植物病理学
作者: 朱春玉
导师: 吴元华
关键词: 嘧肽霉素,抗病毒作用机理,抑制作用,同位素示踪,诱导抗性
文献来源: 沈阳农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 嘧肽霉素是由链霉菌产生的新型抗病毒农用抗生素,对烟草花叶病毒(Tobacco Mosaic Virus,TMV)引起的植物病毒病害有很好的防治效果。本文采用生理生化及分子生物学等手段对嘧肽霉素抗TMV的作用机制进行了深入研究,结果如下: 1、根据嘧肽霉素理化性质和已摸索的分离纯化条件,筛选了一套适合于该抗生素的、经济实用的分离纯化工艺。用吸附法、离子交换法及薄层层析法获得了嘧肽霉素的纯品。本文选用嘧肽霉素的纯品及其制剂进行抗病毒作用机制的研究。 2、嘧肽霉素对不同寄主上由TMV引起的病毒病害具有很好的防治效果。嘧肽霉素对烟草花叶病毒病害防治效果最好,该药剂对TMV具有较强的体外抑制作用,枯斑抑制率达96.2%;对寄主有一定的保护和治疗作用,枯斑抑制率分别为80.4%和39.7%。对TMV引起的辣椒、番茄花叶病毒病害也具有很好的防治效果,可延缓症状出现、减轻发病程度。另外,嘧肽霉素能降低植株体内TMV的浓度,接种前24h喷施嘧肽霉素处理的效果好于接种后24h喷药处理的,药剂与病毒混合1h后再接种的效果最好,抑制率高达96%。 3、嘧肽霉素对TMV粒体具有较强的体外抑制作用和一定的体内抑制作用,抑制率分别为92.1%和32.8%。体外抑制作用在测定的时间段内随着作用时间的增加而增强,并且不能通过稀释药剂来恢复病毒粒子的侵染能力。在电镜下观察,与药剂混合不同时间的病毒粒体结构受到了不同程度的破坏,病毒粒体出现断裂现象。另外药剂与病毒粒体混合液的紫外吸收光谱也发生了很大的变化,出现了没有规律的峰值,这些试验结果都充分说明嘧肽霉素对TMV具有很强的抑制作用。 4、采用生物学,同位素示踪和定量竞争—PCR三种方法系统地研究了嘧肽霉素对TMV—RNA的影响。试验结果表明,嘧肽霉素对离体TMV—RNA具有很强的降解作用,嘧肽霉素处理TMV—RNA后接种心叶烟,平均枯斑抑制率为92.6%;利用~3H—尿苷作为标记物结合放射性免疫分析法研究了嘧肽霉素对烟草花叶病毒RNA合成的影响,结果表明,嘧肽霉素可以抑
论文目录:
摘要
前言
第一章 文献综述：抗病毒药剂研究进展
第一节 抗植物病毒物质的种类
1 天然抗植物病毒物质
2 化学合成的抗病毒物质
第二节 抗病毒药剂作用机制
1 植物病毒抑制剂作用机制
2 抗动物病毒药剂作用机制
3 抗植物病毒药剂存在的问题和展望
第二章 嘧肽霉素的分离纯化及抗病毒效果研究
第一节 嘧肽霉素的分离纯化工艺
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第二节 嘧肽霉素的药效试验
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 嘧肽霉素对TMV在枯斑寄主上的作用
2．2 嘧肽霉素对TMV在系统寄主上的防效
3 小结
第三节 嘧肽霉素处理后植株体内病毒浓度的变化
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第三章 嘧肽霉素对TMV的抑制作用研究
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 药剂对病毒的体外抑制作用
2．2 混合时间对药剂体外抑制病毒作用的影响
2．3 嘧肽霉素对病毒的体内抑制作用
2．4 TMV和嘧肽霉素纯品紫外吸收光谱
2．5 嘧肽霉素对TMV紫外吸收光谱的影响
2．6 电镜观察结果
3 小结
第四章 嘧肽霉素对TMV—RNA的影响
第一节 嘧肽霉素对游离TMV—RNA的体外降解作用
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第二节 药剂对TMV—RNA合成的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 叶盘法测定嘧肽霉素对TMV—RNA合成的影响
2．2 整株法测定嘧肽霉素对TMV—RNA合成的影响
3 小结
第三节 嘧肽霉素对寄主体内TMV—RNA蓄积量的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 总RNA的提取结果
2．2 TMV—RNA的RT—PCR结果
2．3 内参的确定
2．4 各处理的竞争PCR结果
2．5 ELISA法测定结果
3 小结
第四节 嘧肽霉素对TMV—RNA合成相关酶(RNase)的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第五章 嘧肽霉素对TMV外壳蛋白的影响
第一节 嘧肽霉素对于MV外壳蛋白合成的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 叶盘法测定嘧肽霉素对TMV外壳蛋白合成的影响
2．2 整株法测定嘧肽霉素对TMV外壳蛋白合成的影响
第二节 嘧肽霉素对TMV外壳蛋白体外聚合的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第六章 嘧肽霉素对寄主抗病性的影响
第一节 嘧肽霉素对不同寄主防御相关酶系活性的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 蛋白质含量的测定
2．2 各防御相关酶活性的变化
第二节 嘧肽霉素对寄主几种防御酶系同工酶的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 PAL同工酶
2．2 POD同工酶
2．3 PPO同工酶
2．4 SOD同工酶
3 小结
第三节 嘧肽霉素对寄主病程相关(PR)蛋白的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 不同处理对烟草PR蛋白的影响
2．2 不同处理对番茄PR蛋白的影响
3 小结
第四节 嘧肽霉素对寄主植物光合作用的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
2．1 嘧肽霉素对烟草叶绿素含量的影响
2．2 嘧肽霉素对烟草光合指标的影响
3 小结
第五节 嘧肽霉素对烟草G-6-PDH活性的影响
1 材料与方法
2 结果与分析
3 小结
第七章 结论与讨论
参考文献
致谢
英文摘要
附录
发布时间: 2005-09-13
参考文献
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