论文摘要
神经干细胞（neural stem cells,NSCs）是指具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新并能提供大量脑组织细胞的细胞群。神经干细胞具有以下两个基本特性:自我复制能力;多向分化潜能。神经干细胞不仅能促进神经元的再生和脑组织的修复,而且通过基因修饰还可用于神经系统疾病的基因治疗,表达外源性的神经递质、神经营养因子及代谢性酶,为许多难以治疗的神经系统疾病提供了新的治疗途径。虽然这类细胞终身存在,但由于绝对数量和局部微环境的限制,使损伤神经组织自我修复作用微乎其微。采用外源性的神经干细胞移植已被认为是治疗神经系统疾病最具前景的治疗方法之一。过氧化物酶体增殖剂激活受体（peroxisome proliferation-activatedreceptors,PPARs）具有多种生物效应,可促进脂肪细胞分化和脂肪生成,增强机体对胰岛素的敏感性,调解体内糖平衡,抑制炎症因子生成及炎症反应,影响肿瘤生长,对心血管产生保护效应。近年来的研究表明,PPARs还具有神经保护作用,可以减轻阿尔采末病、帕金森病、脑缺血及多发性硬化等神经退行性疾病中神经细胞的损伤。因此,PPARs的研究将极有可能为这些疾病的治疗另辟蹊径。方法本研究采用无血清培养液,给予生长因子bFGF和EGF,利用神经干细胞具有自我更新和增殖能力的特性,从新生大鼠的大脑皮层、室管膜下区和海马等部位分离培养神经干细胞。采用细胞免疫荧光标记法、western blot和RT-PCR分别检测PPARα/PPARβ蛋白或mRNA在神经干细胞不同阶段的表达水平。结果1.免疫荧光定位显示,PPARα/PPARβ蛋白被染成绿色,在神经干细胞上均可见。荧光主要位于细胞核内,细胞质中也有少许,说明它们均主要在细胞核内表达。2.Western blot示,经PPARα/PPARβ抗体分别孵育后出现的强阳性蛋白印迹条带也证实了PPARα/PPARβ在神经干细胞上的表达。并且随诱导分化时间延长,PPARβ表达量逐渐降低,蛋白条带变浅;而PPARα表达量变化不明显。3.RT-PCR示,在未分化及已分化的神经干细胞中均存在有PPARα和PPARβ的mRNA。同western blot结果的趋势一致,PPARβ在神经干细胞分化后显著减少;而PPARαmRNA在神经干细胞分化的过程中变化不大。结论神经干细胞是能自我更新和具有多种潜能的母系神经细胞。它的成功分离和体外培养对通过细胞移植治疗中枢神经系统疾病的研究具有重要意义。PPARα和PPARβ在神经干细胞上均有表达,并且PPARβ的表达量mRNA和蛋白表达水平随着神经干细胞的分化而逐渐减少,提示PPARβ可能参与了对神经干细胞增殖分化的调控。
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