温度和盐度对龟足发育的影响及其遗传多样性的研究

论文摘要

龟足（Pollicipes mitella）是潮间带一种常见的蔓足动物,主要分布在我国东南沿海等地的沿岸。近年来,人们逐渐认识到龟足的营养价值和经济价值,市场对其需求也逐步增大,本研究依托福建省科技厅重点项目（龟足人工育苗的研究）,以产自福建省连江县定海海区的龟足为材料,对其基础生物学特性进行了以下研究:在实验室可控条件下对龟足胚胎和幼虫进行了温度单因子作用以及温度、盐度双因子交互作用的研究,以期寻找龟足幼虫室内培养的最佳温-盐度组合条件。结果显示,龟足的胚胎在18℃-36℃温度之间均能正常发育并且孵化,适宜温度为24℃-33℃;龟足幼虫生长发育的温度上限和下限分别是36℃和18℃,最适温度范围是24℃-30℃;27℃-28‰是龟足胚胎发育最适宜的温-盐度组合,27℃-31‰是培养龟足无节幼虫到金星幼虫的最佳温-盐度条件。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析了龟足成体柄部肌肉的EST、LDH、MDH、ME、G-6-PDH、SOD、AO、ADH、ACP、ALP和POD等11种同工酶。通过酶谱分析共记录了26个基因座位,其中有17个基因座位表现为多态,群体多态位点比例为65.38%,平均每个位点的等位基因数和等位基因的有效数目分别为1.423和1.226。结果表明,龟足野生群体有较高的遗传多态性,但其群体内杂合体较少,纯合体过量,存在近交现象。采用同样的方法对龟足15个发育时期（二细胞期、四-八细胞期、桑椹期、原肠期、缢痕期、红眼点期、黑眼点期、Ⅰ期无节幼虫、Ⅱ期无节幼虫、Ⅲ期无节幼虫、Ⅳ期无节幼虫、Ⅴ期无节幼虫、Ⅵ期无节幼虫、金星幼虫以及变态不久的幼体）的8种（EST、MDH、ME、SOD、AO、ACP、ALP和POD）同工酶进行分析。结果显示,在龟足的不同发育阶段,各种同工酶选择性的表达和关闭,MDH和SOD主要在胚胎时期和幼体阶段表达,EST、ALP和ACP在不同发育时期表达各有特点,POD、ME和AO在龟足的整个发育阶段都保持较高水平的表达。总之,本研究确定了龟足胚胎发育和幼虫生长的适宜温度、盐度,为龟足的人工育苗提供必需的基础性技术资料;分析了龟足群体遗传多样性以及8种同工酶在龟足个体发育的15个时期中基因型的表达,为龟足资源的可持续开发利用和生态保护提供科学依据。此外,本研究可丰富蔓足类动物学知识,对于开展我国龟足的人工养殖以及人工放流、保护龟足资源具有十分重要的意义。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 中文文摘
• 目录
• 绪论
• 一、龟足的生物学特性
• 二、国内外对无柄蔓足类的研究概况
• 三、国内外对有柄蔓足类的研究概况
• 四、生态因子对甲壳类生长发育的影响
• 五、甲壳类遗传多样性的研究现状
• 六、本研究的目的和意义
• 第一章 温度对龟足胚胎和幼虫发育的影响
• 1.1 前言
• 1.2 材料与方法
• 1.2.1 材料
• 1.2.2 方法
• 1.3 结果
• 1.3.1 温度对龟足胚胎发育的影响
• 1.3.2 温度对龟足幼虫生长变态的影响
• 1.4 小结与讨论
• 1.4.1 温度对龟足胚胎发育的影响
• 1.4.2 温度对龟足幼虫生长、变态的影响
• 第二章 温度、盐度对龟足胚胎发育和幼虫生长的交互作用
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 材料
• 2.2.2 方法
• 2.2.3 数据分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 温度、盐度对龟足胚胎发育的交互作用
• 2.3.2 温度、盐度对龟足幼虫生长变态的交互作用
• 2.4 讨论
• 2.4.1 实验中温度、盐度的梯度设置
• 2.4.2 温度、盐度对龟足胚胎发育的交互作用
• 2.4.3 温度、盐度对龟足幼虫生长、变态的交互作用
• 2.5 结论
• 第三章 龟足同工酶的遗传多样性研究
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 材料
• 3.2.2 方法
• 3.2.3 结果指标与数据处理
• 3.3 结果
• 3.3.1 龟足肌肉同工酶电泳图谱分析
• 3.3.2 生化遗传变异的度量
• 3.4 讨论
• 3.4.1 龟足遗传多样性的状况
• 3.4.2 影响同工酶分析结果的主要因素
• 3.4.3 龟足同工酶中的无效等位基因
• 3.4.4 有效遗传标记的筛选
• 第四章 龟足不同发育阶段同工酶的研究
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 材料
• 4.2.2 方法
• 4.3 结果
• 4.3.1 龟足不同发育时期同工酶电泳图谱分析
• 4.4 讨论
• 4.4.1 同工酶与龟足发育
• 4.4.2 酶谱变化与营养方式的转变
• 4.4.3 同工酶与无节幼虫的蜕皮
• 4.4.4 ADH和LDH
• 4.5 小结
• 第五章 结论
• 一、本研究取得的主要进展
• 二、研究展望
• 附录
• 参考文献
• 攻读学位论文期间承担的科研任务与主要成果
• 致谢
• 个人简历