脑得生复方与其单味组分药效及其单味药有效成分机理探讨

论文摘要

目的本研究旨在检验脑得生组方及其单位组份中的川芎和三七的包括粗提物和有效部位对大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion,MCAO）缺血大鼠的脑保护效果,并对各组分药效进行比较。并利用实时定量PCR技术,对脑得生组分中红花的主要活性成分羟基红花黄色素A（hydroxysafflor yellow A,HSYA）的促脑缺血后血管新生作用的早期分子基础做初步探讨。方法:1.建立线栓法致大鼠大脑中动脉阻塞模型,设假手术组（n=10）、模型组（n=10）、脑得生治疗组（0.69g/kg,n=9）脑得生粗提物组（1.241g/kg,n=10）、脑得生有效部位组（0.126g/kg,n=9）、三七粗提物组（1.088g/kg,n=10）、三七有效部位组（0.11g/kg,n=10）、川芎粗提物组（1.088g/kg,n=10）和川芎有效部位组（0.11g/kg,n=10）。缺血后即刻灌胃给药,每半小时一次共5次。于脑缺血后24h观察HSYA对脑缺血大鼠神经行为障碍和MCAO大鼠脑梗死体积的影响。2.以MCAO大鼠为模型,设缺血后3h和24h两个时间点,每个时间点分为假手术组、模型组和HSYA治疗组（n=3）。缺血后即刻舌下静脉给药,HSYA组以一个半衰期（30min）为间隔连续给药5次（每次12mg/kg）,总给药剂量60mg/kg。采用实时定量PCR法分析HSYA对大鼠急性脑缺血后3h、24h缺血侧皮层半暗带中低氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的影响。以磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）为内参,获得HIF-1α、VEGF mRNA的相对含量做组间比较。结果1.与假手术组相比,缺血后24h模型组大鼠神经行为障碍明显,脑梗死体积显著增加。（P＜0.01）2.阳性对照药MK801静脉给药明显改善脑缺血动物神经症状,减小脑梗死体积（P＜0.05）。3.脑得生给药各组（脑得生组、粗提物组、有效部位组）动物神经行为症状均得到明显改善,脑梗死体积显著减小（P＜0.01）。4.川芎粗提物治疗组与有效部位治疗组动物神经行为症状均得到明显善,脑梗死体积显著减小（P＜0.05）。5.三七粗提物治疗组脑梗死体积无明显变化,三七有效部位治疗组动物神经行为症状得到明显改善,脑梗死体积显著减小（P＜0.05）。6.实时定量PCR结果显示,与假手术组比较,缺血后3小时模型组脑皮层半暗带的VEGF、HIF-1α、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因表达显著下调（P＜0.05）,而HSYA可使酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）、bFGF、HIF-1αmRNA表达明显上调（P＜0.05）;缺血后24h,模型组中HIF-1αmRNA表达上调,HSYA组HIF-1αmRNA表达上调同时bFGF、VFGF mRNA表达显著增加（P＜0.05）。结论1.脑得生复方及其单味组分三七和川芎对MCAO大鼠脑缺血状况具有恢复作用,同时其各组有效部位提取物效果也很明显。2.HSYA对血管新生相关基因:HIF-1α和VEGF在转录水平具有上调作用,这可能是HSYA促血管新生的主要分子学基础。

论文目录

• 前言
• 摘要
• Abstract
• 第一章 脑得生及其组分各组对MCAO大鼠脑保护作用
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 1.3 结果
• 第二章 实时定量PCR方法检测HSYA对HIF-1α、VEGF转录水平表达的影响
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 2.3 实验结果
• 第三章 讨论
• 第四章 结论
• 致谢
• 综述
• 参考文献