本文主要研究内容
作者李小冬,尚以顺,武语迪,王学敏,熊先勤,陈光吉,孙方,张文,蔡一鸣(2019)在《紫花苜蓿MsMBF1c基因在拟南芥中表达提高转基因植株的耐热性》一文中研究指出:高温能危害植物的生长发育,是限制紫花苜蓿在南方地区推广的主要非生物胁迫因素之一。从"中苜1号"紫花苜蓿品种克隆获得紫花苜蓿多桥蛋白1c(Medicago sativa Multi protein Bridging Factors 1c, MsMBF1c)全长编码序列,发现紫花苜蓿MsMBF1c蛋白与拟南芥AtMBF1c蛋白同源相似性高达72%。分析MsMBF1c在根、茎、叶、花和果实等不同组织中,以及在高温、干旱以及高温和干旱组合胁迫条件下的表达模式,发现该基因在不同组织中的表达强度依次为花>根>叶>茎>果实;MsMBF1c显著受高温、干旱以及高温和干旱组合诱导,分别被上调4.21、2.15和4.59倍。构建pBI121-35S:MsMBF1c过量表达载体并转入模式植物拟南芥(wild type, WT),在T3代获得卡那抗性不分离的过量表达株系(over expression, OE);利用OE与Atmbf1c突变体(mutant, MUT)杂交的方法获得互补株系(complementary, COM),并通过PCR与qRT-PCR的方法进行分子和表达验证。平行比较OE、COM、MUT以及WT等不同拟南芥株系在高温胁迫后的种子发芽率和幼苗存活率,在正常情况下,OE、COM、MUT以及WT拟南芥株系种子的发芽率没有显著差异(97.6%~100.0%),高温胁迫后,WT发芽率下降到71.7%,MUT发芽率下降到66.0%,显著低于WT(P<0.05);而COM与3个独立的OE株系的发芽率达79.3%~87.0%,显著高于WT(P<0.05)。在幼苗耐热试验中,OE、COM、MUT以及WT株系的存活率在正常条件下差异不显著,高温胁迫后,WT幼苗存活率下降到16.7%,MUT下降到10.0%,显著低于WT(P<0.05);而COM与3个独立的OE株系存活率下降到40.0%~76.7%,显著高于WT(P<0.05)。利用real-time PCR方法,分析HSFA1a、HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY25、WRKY18、DREB2a等耐热调节关键基因在OE、MUT和WT拟南芥株系的相对表达情况,在正常条件下,HSFA2、WRKY18与DREB2a在MUT株系中的表达显著低于WT(0.33~0.47)。而在OE株系中,除HSFA1a外,HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY25、WRKY18、DREB2a的表达相对WT株系都有不同程度上调,幅度为1.74~3.80。高温胁迫后,与WT相比,HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY18与DREB2a在MUT株系中的表达中被显著下调,在OE株系中,只有WRKY18显著高于WT外,其余基因的表达在OE与WT株系中差异不显著。综合分析,MsMBF1c是一个功能比较保守的耐热调节基因,过量表达MsMBF1c能够互补拟南芥mbf1c突变体耐热缺失表型,并能够增强拟南芥在种子萌发与幼苗生长阶段的耐热性。MsMBF1c可能与AtMBF1c一样,与其他耐热调节关键基因互作调节植物耐热性。
Abstract
gao wen neng wei hai zhi wu de sheng chang fa yo ,shi xian zhi zi hua mu xu zai na fang de ou tui an de zhu yao fei sheng wu xie pai yin su zhi yi 。cong "zhong mu 1hao "zi hua mu xu pin chong ke long huo de zi hua mu xu duo qiao dan bai 1c(Medicago sativa Multi protein Bridging Factors 1c, MsMBF1c)quan chang bian ma xu lie ,fa xian zi hua mu xu MsMBF1cdan bai yu ni na gai AtMBF1cdan bai tong yuan xiang shi xing gao da 72%。fen xi MsMBF1czai gen 、jing 、xie 、hua he guo shi deng bu tong zu zhi zhong ,yi ji zai gao wen 、gan han yi ji gao wen he gan han zu ge xie pai tiao jian xia de biao da mo shi ,fa xian gai ji yin zai bu tong zu zhi zhong de biao da jiang du yi ci wei hua >gen >xie >jing >guo shi ;MsMBF1cxian zhe shou gao wen 、gan han yi ji gao wen he gan han zu ge you dao ,fen bie bei shang diao 4.21、2.15he 4.59bei 。gou jian pBI121-35S:MsMBF1cguo liang biao da zai ti bing zhuai ru mo shi zhi wu ni na gai (wild type, WT),zai T3dai huo de ka na kang xing bu fen li de guo liang biao da zhu ji (over expression, OE);li yong OEyu Atmbf1ctu bian ti (mutant, MUT)za jiao de fang fa huo de hu bu zhu ji (complementary, COM),bing tong guo PCRyu qRT-PCRde fang fa jin hang fen zi he biao da yan zheng 。ping hang bi jiao OE、COM、MUTyi ji WTdeng bu tong ni na gai zhu ji zai gao wen xie pai hou de chong zi fa ya lv he you miao cun huo lv ,zai zheng chang qing kuang xia ,OE、COM、MUTyi ji WTni na gai zhu ji chong zi de fa ya lv mei you xian zhe cha yi (97.6%~100.0%),gao wen xie pai hou ,WTfa ya lv xia jiang dao 71.7%,MUTfa ya lv xia jiang dao 66.0%,xian zhe di yu WT(P<0.05);er COMyu 3ge du li de OEzhu ji de fa ya lv da 79.3%~87.0%,xian zhe gao yu WT(P<0.05)。zai you miao nai re shi yan zhong ,OE、COM、MUTyi ji WTzhu ji de cun huo lv zai zheng chang tiao jian xia cha yi bu xian zhe ,gao wen xie pai hou ,WTyou miao cun huo lv xia jiang dao 16.7%,MUTxia jiang dao 10.0%,xian zhe di yu WT(P<0.05);er COMyu 3ge du li de OEzhu ji cun huo lv xia jiang dao 40.0%~76.7%,xian zhe gao yu WT(P<0.05)。li yong real-time PCRfang fa ,fen xi HSFA1a、HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY25、WRKY18、DREB2adeng nai re diao jie guan jian ji yin zai OE、MUThe WTni na gai zhu ji de xiang dui biao da qing kuang ,zai zheng chang tiao jian xia ,HSFA2、WRKY18yu DREB2azai MUTzhu ji zhong de biao da xian zhe di yu WT(0.33~0.47)。er zai OEzhu ji zhong ,chu HSFA1awai ,HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY25、WRKY18、DREB2ade biao da xiang dui WTzhu ji dou you bu tong cheng du shang diao ,fu du wei 1.74~3.80。gao wen xie pai hou ,yu WTxiang bi ,HSFA2、HSFA3、HSFB1、WRKY18yu DREB2azai MUTzhu ji zhong de biao da zhong bei xian zhe xia diao ,zai OEzhu ji zhong ,zhi you WRKY18xian zhe gao yu WTwai ,ji yu ji yin de biao da zai OEyu WTzhu ji zhong cha yi bu xian zhe 。zeng ge fen xi ,MsMBF1cshi yi ge gong neng bi jiao bao shou de nai re diao jie ji yin ,guo liang biao da MsMBF1cneng gou hu bu ni na gai mbf1ctu bian ti nai re que shi biao xing ,bing neng gou zeng jiang ni na gai zai chong zi meng fa yu you miao sheng chang jie duan de nai re xing 。MsMBF1cke neng yu AtMBF1cyi yang ,yu ji ta nai re diao jie guan jian ji yin hu zuo diao jie zhi wu nai re xing 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自草业学报的李小冬,尚以顺,武语迪,王学敏,熊先勤,陈光吉,孙方,张文,蔡一鸣,发表于刊物草业学报2019年10期论文,是一篇关于高温论文,紫花苜蓿论文,耐热性论文,耐热相关基因论文,草业学报2019年10期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自草业学报2019年10期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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