GDNF及GDNFmRNA在正常和单眼形觉觉剥夺性弱视大鼠视中枢的表达

论文摘要

目的:研究正常与单眼视觉剥夺大鼠发育过程中外侧膝状体及视皮层的胶质源性神经生长因子（glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF）以及GDNF的信使RNA（message RNA,mRNA）的表达情况,为探讨弱视的发病机制提供可能的依据,为临床上寻找有效预防和治疗弱视的方法提供参考依据。方法:1、缝合生后14d大鼠单侧眼睑,制作单眼视觉剥夺弱视大鼠动物模型,和正常组共同饲养至生后45d（postnata145,p45）时取材,所得标本分为单眼形觉剥夺弱视组（MD）和正常对照组（N）。2、应用免疫组织化学染色法观察单眼形觉剥夺弱视组（MD）和正常对照组（N）外侧膝状体和视皮层GDNF蛋白的表达:3、应用逆转录PCR（RT-PCR）法观察单眼形觉剥夺弱视组（MD）和正常对照组（N）外侧膝状体和视皮层GDNFmRNA的表达;4、对结果进行摄像显微镜照相,计算机图像分析系统进行图像分析,SPSS13.0统计软件进行方差分析。结果:1、免疫组化结果表明:（1）GDNF阳性细胞在正常组和单眼形觉剥夺弱视组外侧膝状体和视皮层均有表达;（2）GDNF阳性细胞在单眼形觉剥夺对侧皮层表达明显少于正常组（p=0.013）,GDNF阳性细胞在正常组和单眼形觉剥夺组对侧外侧膝状体表达没有明显差别（p=0.822）;2、RT-PCR结果显示:（1）正常组和弱视组的视皮层和外侧膝状体均有GDNFmRNA的表达;（2）正常组大鼠视皮层GDNFmRNA的表达量高于单眼形觉剥夺组（MD）,两者之间的差异有统计学意义。（p＜0.05）;结论:1、GDNF在正常和形觉剥夺大鼠外侧膝状体和视皮层均有表达;2、单眼形觉剥夺弱视大鼠弱视眼对侧大脑视皮质的GDNF和GDNFmRNA表达与正常组相比减少,而外侧膝状体中GDNF的表达差异没有统计学意义;3、GDNF和GDNFmRNA在弱视组大鼠相应的视皮层的表达均降低,推测异常的视觉经验（单眼视觉剥夺）可能会导致视皮层GDNF和GDNFmRNA表达下调,影响视觉系统正常发育过程;GDNFmRNA可能通过影响转录参与视觉发育;4、GDNF在视觉系统的作用可能是单眼剥夺性弱视发生的分子生物学基础之一,可能在剥夺性弱视视皮层的改变中起一定的作用,但在外侧膝状体可能发挥其它作用。

论文目录

• 中文摘要
• abstract
• 英文缩略语
• 论文正文
• 引言
• 第一部分 GDNF在正常及单眼剥夺性弱视大鼠视中枢的表达
• 1.材料与方法
• 1.1 实验动物及饲养环境
• 1.2 主要仪器及试剂
• 1.3 实验分组
• 1.4 弱视动物模型的建立
• 1.5 取材及标本处理
• 1.6 HE染色及免疫组化染色
• 2 结果
• 2.1 HE染色观察形态学改变
• 2.2 免疫组织化学方法观察GDNF表达
• 3 讨论
• 4 小结
• 第二部分 GDNFmRNA在正常及单眼剥夺性弱视大鼠外侧膝状体及视皮层的表达
• 1.材料与方法
• 1.1 实验动物
• 1.2 主要仪器及试剂
• 1.3 引物
• 1.4 实验分组及弱视动物模型的建立
• 1.5 取材及标本处理
• 1.6 RT-PCR
• 1.6.1 实验前准备
• 1.6.2 组织总RNA提取
• 1.6.3 RT:使提取的总RNA逆转录成cDNA
• 1.6.4 合成的cDNA用于PCR
• 1.6.5 结果观察与统计学处理方法:
• 2.结果
• 3.讨论
• 4.小结
• 全文结论
• 参考文献
• 附录
• 1.本人简历
• 2.在校期间发表的文章及参与的课题
• 致谢
• 文献综述及参考文献