液相微萃取法测定血清中药物浓度

论文摘要

中空纤维膜液相微萃取是一项新的样品前处理技术,该技术以具有一定大小孔径的中空纤维膜为萃取有机溶剂的载体,当利用中空纤维膜液相微萃取进行萃取实验时,因有机溶剂不直接与样品溶液相接触,从而避免了有机溶剂对样品的干扰。同时该技术集采样、萃取、浓缩于一体。因为药物在有机溶剂中有较大的溶解度,所以能够得到高灵敏度。实验中中空纤维膜只适用一次,避免了交叉污染;另外,中空纤维膜液相微萃取实验操作简单,试验者可以自行设计实验装置。本文分为五个部分,扩展了中空纤维膜液相微萃取的应用,并且对实验装置进行了设计和研究。首先,对液相微萃取的发展和应用做了较细致的总结,阐述了中空纤维膜液相微萃取常用的三种萃取模式(液液两相微萃取、液液液三相微萃取、载体转运萃取)的原理和应用范围。本文还对实验中的主要影响因素进行了归纳,分析了优化实验条件的方法途径。本文提出一种新的测定血清中药物的方法,即,结合药物在水相和有机相之间的平衡常数与其血清蛋白结合率来测定血清中药物浓度,该方法不用加入有机溶剂沉淀蛋白,因此省去了沉淀、离心、挥发有机溶剂等操作步骤,实验相对误差小,完全可以作为一种新的血清中药物浓度测定方法;其次,结合有机溶剂沉淀蛋白使药物游离对血清中低浓度药物进行定量,以达到提高灵敏度的目的。作为定量的前提还准确测定了吲哚美辛和醋酸地塞米松两种药物的蛋白结合率,并对实验影响因素进行了考察。利用中空纤维膜液相微萃取来测定药物的蛋白结合了率,因有机溶剂不直接与生物样品接触,对蛋白活性几乎没有影响,本方法与经典平衡透析法相比,具有所需实验时间短等优点。与超滤法相比,有机膜面积非常小,使用样品量小,克服了药物在膜上的吸附问题。本文还对实验装置进行了探索研究,根据膜的性质以及与有机溶剂的兼容性等,选取了聚丙烯、透析膜、聚四氟乙烯三种材料的膜进行实验,从静态萃取和动态萃取两个方面对聚丙烯膜进行考察,而透析膜和聚四氟乙烯膜则是选择水溶性的对甲苯磺酸进行动力学考察。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 文献综述
• 引言
• 1.1 液相微萃取技术的发展
• 1.1.1 单滴溶剂微萃取的发展
• 1.1.2 单滴溶剂微萃取的原理
• 1.1.3 单滴溶剂微萃取的影响因素
• 1.1.3.1 有机溶剂种类与液滴大小
• 1.1.3.2 搅拌速度对单滴溶剂微萃取的影响
• 1.1.3.3 盐效应对单滴溶剂微萃取的影响
• 1.1.3.4 酸碱度对单滴溶剂微萃取的影响
• 1.1.3.5 温度对单滴溶剂微萃取的影响
• 1.1.4 中空纤维膜液相微萃取的发展
• 1.1.4.1 萃取装置
• 1.1.4.2 萃取模式
• 1.1.5 中空纤维膜液相微萃取法的原理
• 1.1.5.1 液-液两相微萃取
• 1.1.5.2 液-液-液三相微萃取
• 1.1.5.3 载体转运
• 1.1.6 液相微萃取影响因素
• 1.2 液相微萃取技术的应用
• 1.2.1 单滴微萃取的应用
• 1.2.1.1 在生物分析中的应用
• 1.2.1.2 环境分析中的应用
• 1.2.2 中空纤维膜液相微萃取的应用
• 1.2.2.1 生物分析中的应用
• 1.2.2.2 环境分析和食品分析
• 第二章 通过药物蛋白结合率测其在血清中的浓度
• 引言
• 2.1 实验原理
• 2.2 实验用药的选取
• 2.3 试剂和仪器
• 2.4 各种溶液的配制
• 2.4.1 药物溶液的配制
• 2.4.2 缓冲溶液的配制
• 2.5 色谱条件
• 2.6 吲哚美辛标准曲线的绘制
• 2.7 实验操作
• 2.8 实验结果
• 2.9 实验中富集效果考察
• 2.10 小结
• 第三章 药物血清蛋白结合率的测定
• 引言
• 3.1 实验原理
• 3.2 试剂和仪器
• 3.3 各种溶液的配制
• 3.3.1 药物溶液的配制
• 3.3.2 缓冲溶液的配制
• 3.4 色谱条件
• 3.5 药物Log D 的测定
• 3.5.1 实验准备与实际操作
• 3.5.2 实验结果
• 3.6 影响因素的考察
• 3.6.1 中空纤维膜
• 3.6.2 有机溶剂
• 3.6.3 萃取时间
• 3.6.4 pH 影响
• 3.6.5 动态萃取过程
• 3.7 药物血清蛋白结合率的测定
• 3.7.1 中空纤维膜液相微萃取对药物蛋白结合平衡的影响
• 3.7.2 实验准备与操作
• 3.7.3 实验结果
• 3.7.4 小结
• 第四章 去除蛋白后测定血清中总药物浓度
• 4.1 实验原理
• 4.2 实验用药的选取
• 4.3 实验试剂与仪器
• 4.4 色谱条件
• 4.5 实验准备
• 4.6 实验操作
• 4.7 实验结果
• 4.8 小结
• 第五章 实验装置
• 引言
• 5.1 实验材料的选取
• 5.2 试剂与仪器
• 5.3 聚丙烯膜的实验
• 5.4 透析膜实验
• 5.5 聚四氟乙烯
• 5.6 小结
• 参考文献
• 发表论文和科研情况说明
• 致谢