月季组织培养及利用ISSR标记进行遗传多态性分析

月季组织培养及利用ISSR标记进行遗传多态性分析

论文摘要

月季是我国十大名花之一,栽培历史悠久,优良品种繁多,色彩丰富艳丽,花容花姿秀美,芳香馥郁宜人,四时花开不断,故有“花中皇后”之美称,深受世界人民的喜爱。月季在我国广泛栽培,在城市绿化中起着重要作用。本试验主要研究了月季的再生、扩繁,并利用ISSR分子标记技术分析了月季资源的遗传多样性。主要结果如下:1.建立了三个切花月季品种和8个微型月季品种的扩繁体系。结果表明最适合月季扩繁的基本培养基为MS,在含较低浓度的NAA(0-0.1mg/L)和BA(0.5-3mg/L)组合的培养基上可以较好地进行扩繁,外植体用茎段优于用茎尖。茎段扩繁系数最高的是‘北京2’,为6.71,最低的为‘白米农’2.73;以茎尖为外植体扩繁的‘金太阳’和‘北京2’扩繁系数都为2.57。2.研究了几个月季品种的试管苗生根情况。培养基以1/2MS最好,在添加NAA0.01mg/L时,平均生根数为14.67,平均长度为2.53cm。移栽到蛭石中生长最健壮,成活率达99%以上。‘北京6’、‘金太阳’和‘巴西诺’则在添加NAA0.1mg/L水平上生根明显优于在0.05mg/L水平上。3.几个月季品种再生的优化。基本培养基1/2MS,添加葡萄糖30g/L,植物凝胶2.5g/L,AgNO3(10mg/L)和CH(100mg/L),‘北京6’再生率最高的激素组合为NAA0.05mg/L和TDZ1.0mg/L,达76%,在NAA0.01mg/L、TDZ0.5mg/L,NAA0.01mg/L、TDZ 2.0mg/L,NAA0.05mg/L、TDZ0.5mg/L培养基上再生率也都能达到70%以上;而200660再生率最高的为NAA 0.05mg/L、TDZ 1.5mg/L组合,再生率为79.2%,其它培养基中再生率低;‘北京2’、‘北京5’在NAA 0.01mg/L+TDZ 1.0 mg/L上再生率最高,分别达到59.7%和57.3%;此外我们还比较了其它14个品种在NAA0.05mg/L、TDZ 1.5 mg/L的再生率,结果为‘状元红’再生率最高,达53.3%,其次为‘伊丽莎白’和‘黑玫瑰’,分别达41.0%和39.0%,而‘黑夫人’、‘荒城’、‘摩洛哥公主’、‘金奖章’、‘坦尼克’、‘钻石’再生率为0。4.62个月季品种的ISSR分析。从38个引物中筛选出8个引物,扩增出清晰、稳定条带116条,多态性片段113条。这些片段能将62个材料完全区分开,每个引物扩增的谱带有13-16个,而且扩增谱表现出很高的多态性,表明月季品种之间的遗传多态性很高。并且利用筛选出的8个引物扩增出的116条片段来做聚类分析,绘制了62个供试材料的亲缘关系树状图,聚类结果基本能反映出各类群所含品种遗传背景的一致性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 英文缩略表
  • 1 文献综述
  • 1.1 关于月季组织培养的研究
  • 1.1.1 关于月季组培快繁技术的研究
  • 1.1.2 关于植株再生的研究
  • 1.2 月季分类及分子标记
  • 1.2.1 蔷薇属植物的演化进程及园艺分类
  • 1.2.2 现代月季的分类
  • 1.2.3 分子标记
  • 1.3 研究意义和目的
  • 2 材料与方法
  • 2.1 3个切花月季和8个微型月季品种快繁试验材料方法
  • 2.1.1 供试材料和来源
  • 2.1.2 试验方法
  • 2.1.3 数据处理
  • 2.2 月季植株再生的材料方法
  • 2.2.1 供试材料和来源
  • 2.2.2 方法
  • 2.2.3 数据处理
  • 2.3 ISSR分析的材料方法
  • 2.3.1 材料及来源
  • 2.3.2 方法
  • 3 结果与分析
  • 3.1 微型月季微繁体系
  • 3.1.1 切花月季腋芽的诱导
  • 3.1.2 微型月季腋芽的诱导
  • 3.1.3 炼苗移栽
  • 3.2 植株再生
  • 3.3 ISSR分析结果
  • 3.3.1 基因组 DNA的提取
  • 3.3.2 引物筛选及多态性分析
  • 3.3.3 聚类分析
  • 4 讨论与结论
  • 4.1 讨论
  • 4.1.1 扩繁
  • 4.1.2 再生
  • 4.1.3 分子标记
  • 4.2 结论
  • 参考文献
  • 附图
  • 致谢
  • 相关论文文献

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