论文摘要
三丁基锡（tributyltin，TBT）曾主要作为很有效的杀虫剂添加在船舶油漆中防止海洋软体生物的附着。近年来的研究发现TBT可对海洋生态系统产生严重危害，尤其致软体动物发生性畸变，致使种群退化、数量锐减。已被许多国家明令禁用。但由于TBT在环境中难于降解，即使在停用相当长时间后，海水和底泥中仍存在TBT，继而在海洋生物中蓄积，且经蒸煮后仍会存在。提示食用海产品可能存在TBT的潜在危害。三丁基氯化锡（tributyltin chloride，TBTC）是TBT在水中的主要存在形式之一，许多学者通过对青春前期、青春期大鼠或对两代鼠连续染毒研究了TBTC对雄性生殖系统的影响，本文主要探讨孕期TBTC暴露对子代雄性大鼠生殖内分泌系统的影响。目的：探讨孕期TBTC暴露对Wistar大鼠子代雄性鼠生殖器官发育、合成和分泌睾酮功能、生精功能、睾丸酶活力、睾丸组织结构及对下丘脑-垂体-性腺轴的影响。方法：健康成年Wistar大鼠雌雄同笼配种，将妊娠大鼠随机分为4组，每组4只。在妊娠第12～20d灌胃染毒，染毒第1d对孕鼠称重，以后每3d称重1次，以0、1、2．5、5mg/kg剂量的TBTC（TBTC用玉米油溶解）溶液对孕鼠连续灌胃染毒，各剂量组大鼠灌胃量均为5ml/kg·bw。仔鼠出生后第21d（PND21）断乳，雌雄分笼，雄性仔鼠继续饲养。至第70d（PND70），每组随机抽取10只，称重后断头采血4～5ml，室温下以3000g·min-1速度离心10min，分离并收集血清700～800μl，-20℃保存。分离双侧睾丸及附睾组织，称重并计算脏器系数。左侧睾丸于-80℃保存；右侧睾丸用中性福尔马林缓冲液（4％甲醛）固定，制作石蜡切片，观测睾丸的病理变化；附睾置于-20℃保存，用作精子计数。采用酶联免疫法测定血清睾酮（T）浓度，放射免疫法测定睾丸组织T浓度及血清黄体生成素（LH）、卵泡刺激素（FSH）水平，紫外可见分光光度法测定睾丸酶活力。结果：结果显示，各染毒组孕鼠平均产仔数及雌雄比例与对照组相比差异均无统计学意义。检测出生后70d子代雄性大鼠的各指标结果显示，5和2.5mg/kg剂量组的大鼠体重增重量（PND21～70）显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.01）。各组睾丸脏器系数随染毒剂量增高有上升趋势，与对照组相比，2.5和5mg/kg剂量组睾丸脏器系数显著增高，差异有统计学意义（P＜0.01）；各染毒组附睾尾精子数、睾丸组织中T浓度均显著增高，差异有统计学意义（P＜0.01）；附睾脏器系数和血清T浓度未显著增高，差异无统计学意义（P＞0.05）；LH、FSH浓度未发生变化。随染毒剂量增高，乳酸脱氢酶（LDH）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活力均有增高趋势。与对照组相比，各染毒组的LDH活力及2.5、5mg/kg剂量组的SDH活力显著增高，差异有统计学意义（P＜0.01）；各染毒组的酸性磷酸酶（ACP）、一氧化氮合酶（NOS）活力未发生改变。观察睾丸的组织结构发现，各染毒组大鼠与对照组相比，其睾丸未发生明显组织学改变，间质无水肿，间质细胞未见增生、坏死等改变；曲细精管内精原细胞及各级精母细胞未见空泡化、增多、坏死等改变。结论：在妊娠中晚期暴露于TBTC会影响子代雄性大鼠的体重增长，促进睾丸发育，使睾丸中T浓度增高，睾丸生精功能增强，而尚未引起睾丸发生组织学改变；精子生成增多使得LDH和SDH这些睾丸标志酶活力代偿性增强；睾丸中T浓度的增高并不是由于下丘脑—垂体—睾丸轴的功能改变引起的。